マガジンのカバー画像

実験関係のメモ的な

6
本
運営しているクリエイター
た

#プロトコル

た

た

pGEM-T assay プロトコル

概要

自前のインサートとキットの溶液を混ぜて室温で1時間

反応液

2 x Rapid Ligation Buffer, T4 DNA Ligase ... 5 μl
pGEM-T Vector(50ng/μl) ... 1 μl
insert(PCR product) ... X μl
T4 DNA Ligase ... 1 μl
MilliQ ... 3-X μl

・Positive C

もっとみる
た

た

electrocompetent cellの作成

【背景・目的】

コンピテントセルの作成は研究室の日常業務であるものの、シングルコロニーを取ったり、コンピテントセル作成用の培地を用意したり、氷上や低温で操作したりと用意するもの・やることが複雑で時間がかかる。
しかしググってみると培地はいつも使うLBでよかったり、シングルコロニーではなくグリセロールストックから採取する、室温で操作するといった手の抜きどころが散見される。特にエレポコンピは室温で作

もっとみる
た

た

実験関係ノート #2 NID-miniprep

NID miniprep
長所：チューブ1本でminiprepできる
　　　カラムいらない
短所：カラムよりはちょっと汚い（制限酵素処理には使える）
https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0023457

1) 1.5-2 ml of bacterial cultures were pelleted at

もっとみる