乳がん治療の中国生薬「フアイア」基礎研究及び臨床研究の最新エビデンス
乳がん治療の中国生薬「フアイア」はがん増殖抑制・免疫調整作用・がん転移抑制・EMT抑制・アポトーシス誘導・抗がん剤との相乗効果など治療効果があることが分かってきました。前半は中国における基礎研究の成果、後半にGut2018に掲載された肝細胞癌に対するアジュバント治療の多施設臨床試験と乳がん治療の後ろ向き研究（プロペンシティ・スコア・マッチングによる解析）の結果、現在進行中の転移性乳がんと原発性トリプルネガティブ乳がん、進行乳がんに対する臨床試験についてお伝えします。
（図）フアイアの免疫調整作用 (Frontiers in immunology 2023)
（はじめに）
乳がんは世界中の女性におけるがんによる死因の中で最も多いです。Trametes robiniophila Murr（Huaier：フアイア）は、中国で約1600年間、古来から人々の健康を守るために使用されてきた伝統的薬草です。近年、フアイアは多くの種類の悪性腫瘍に対して効果があることが証明されています。当ページでは乳がん治療に焦点を当て、基礎研究におけるフアイヤの水抽出物および多糖類のがん細胞への機能をまとめました。フアイヤは低毒性で乳がんの進行を著しく抑制し、免疫反応を増強し、放射線療法や化学療法に対する感受性を高めることができることが期待できます。臨床研究ではフアイア顆粒の人に対する治療効果および有害事象（副作用）をまとめます。乳がん治療における補完代替医療としてのフアイアが有望な選択肢になることを広く知って頂きたいと思います。
（引用文献：Chen Li et al, Trametes robiniophilia Murr in the treatment of breast cancer, Biomedicine and Pharmacotherapy 128(2020),110254をもとに文章を分かりやすく改変しました）
（導入）
乳がんの標準療法は、再発と死亡のリスクを減少させるために進歩しましたが、抗がん剤や分子標的療法、免疫チェックポイント阻害薬などの新規化学療法は高い奏効率である一方、重篤な副作用、たとえば吐き気、嘔吐、末梢神経障害、痛み、不眠など、生活の質を大きく低下させます。
補完代替医療として中国生薬フアイアは、がん患者に有効な治療オプションとして考えられ、近年中国だけでなく、米国でも正規の臨床試験を経て、その治療効果と安全性のエビデンスを出してきました。現在進行中の臨床試験もあり、将来、乳がんを含む悪性腫瘍の患者の生存時間と生活の質を大幅に改善することが期待されています。
キノコの一種であるフアイアは、1600年前から伝統薬草として使われてきましたが、最近では、フアイアの抗がん作用に注目されています。明らかな抗腫瘍活性にもかかわらず、フアイアの薬理学的メカニズムは基礎研究レベルで細胞増殖の抑制、細胞周期の停止、免疫応答の増強、がん幹細胞の抑制などが証明されています。本ページでは、フアイアのもつ機能的多糖類が、乳がん治療における治療効果と作用標的に焦点を当て、研究成果をまとめました。
（抽出方法）
フアイアの菌は粉末に挽いて熱水で抽出されます。Sevag法を用いて非結合タンパク質およびアミノ酸は慎重に除去され、さらに微小分子およびその他の不純物を除去するため、水溶液は72時間ろ過さます。エタノール沈殿後、遠心分離および脱水分解によってフアイヤの沈殿物が精製されす[29,30]。有効成分はHPLCおよびSDS-PAGE分析によって検査します[31,32]。精製した沈殿物のばらつきを避けるためにクロマトグラフィーフィンガープリント分析によって品質管理されます[30,33]。基礎研究で使用されたフアイヤの膏薬はGaitianli Medicine Co. Ltd（江蘇省、中国）によって提供されました。1グラムの膏薬は10mlの完全培地に溶解され、0.22μmフィルターで滅菌されました。最終的に100mg/mlのストック溶液は長期保存のために-20°Cで保管されました。フアイアの水抽出物は10%の胎牛血清（FBS）を含む培地で希釈されてから使用されました。
（基礎研究の概要）
RNAシーケンシングとマイクロアレイの手法を用いてフアイアのもつ乳がん細胞への作用について機能解析を行いました。HTA 2.0トランスクリプトームマイクロアレイ解析を用いたKongらの研究では、フアイアは乳がんの腫瘍形成に影響を与えることが示されました。具体的な作用として、DNA依存転写、アポトーシス、細胞周期停止、低酸素応答、免疫応答、DNA複製、細胞増殖などが挙げられます。
KEGGパスウェイ解析では、がん細胞へのフアイア投与後に、細胞内シグナルネットワークが変化したことが示されました。MAPKシグナル伝達経路、NF-κBシグナル伝達経路、アポトーシス、細胞周期、DNA複製、代謝経路への作用が挙げられます。この研究の結果、フアイアが乳がん治療における潜在的な役割を果たすことが予測されました。
（図）代表的な乳がんサブタイプ別の細胞株一覧
（フアイアのがん細胞への増殖抑制作用）
乳がんなどの悪性疾患において、最も頻繁に変異する遺伝子はp53です。p53はアポトーシスと細胞周期停止に重要ながん抑制因子ですが、p53に変異を起こすとこの機能が低下します。フアイア水抽出物がMCF-7乳がん細胞において正常なp53のタンパク質レベルを増加させることが分かりました。しかし、MDA-MB-231乳がん細胞では同様の効果は見られませんでした。また他の研究では、フアイアとRadix Isatidisの固形発酵抽出物がSK-BR-3およびMDA-MB-231細胞のp53およびカスパーゼ-3の発現を上昇させることが報告されています。（＊カスパーゼ-3活性化はがん細胞のアポトーシスを示唆します）
また、細胞核内のNF-κBは増殖、血管新生、浸潤、転移、アポトーシスの調節に重要な役割を果たします。フアイア抽出物はMCF-7、T47D、およびZR-75-1乳がん細胞において、エストロゲン刺激によるNF-κBの活性化を著しく減少させることが報告されています。NF-κBタンパク質複合体の重要な構成要素はP65およびIκBαであり、これらの基礎研究はフアイヤがホルモン感受性の高い乳がんには腫瘍増殖抑制作用、ホルモン感受性の低い乳がんにはアポトーシス誘導作用があることを示唆しています。
（パクリタキセルとの相乗効果）
パクリタキセルはp65の増加を引き起こし、フアイア抽出物はp65のダウンレギュレーションとIκBαの増加を通じて、パクリタキセルの抗増殖効果を著しく高めることが示唆されます。
PI3K/AKT/mTORシグナル伝達経路は、細胞周期の進行、細胞の生存、代謝、アポトーシス、血管新生、薬剤耐性などのがんのさまざまな特徴を制御します。免疫組織化学染色により、フアイアはBT474乳がん異種移植片においてPI3K/AKTシグナル伝達経路を著しく抑制することが示されましたが、MDA-MB-231異種移植片ではこの現象は観察されませんでした。これはMDA-MB-231細胞株におけるPI3Kの低発現に起因する可能性があります。
（フアイアとホルモン療法との相乗効果）
がん細胞に内在するmiRNAは約22ヌクレオチドの内在性非コードRNAであり、がんの発生過程（細胞分化、増殖、生存）に関与しています。Gaoらの研究では、フアイア抽出物がMCF7細胞のミオグロビン変異（ATM）の発現を増加させ、その下流標的をリン酸化することによってmiR-203を減少させることが示されています。フアイアはタモキシフェン耐性およびフルベストラント耐性のMCF7細胞において明らかに増殖を抑制し、G0/G1細胞周期停止を引き起こしました。これらの結果は、フアイアがホルモン感受性の高い乳がんの内分泌抵抗性への治療に効果があることを示唆しています。
LncRNAも内在性非コードRNAの一種であり、エピジェネティック、転写、転写後のメカニズムを通じて遺伝子発現を調節します。CBLは複数の悪性腫瘍において腫瘍抑制因子として作用することが証明されており、CBL変異はがんの進行を促進させると考えられています。Wangらの報告によれば、lncRNA H19はCBLの腫瘍抑制効果を減少させることが示されており、フアイア抽出物はlncRNA H19の発現レベルをダウンレギュレーションすることで、MDA-MB-231、MDA-MB-468、およびMCF7乳がん細胞株におけるCBLの分解を減少させます。最近、Wangらはlinc00339がmiR-4656をスポンジングしてCSNK2Bを調節することにより乳がんの進行を抑制することを報告しており、フアイアはlinc00339/miR-4656/CSNK2B経路を通じて乳がんの増殖を抑制することが証明されています。このようにフアイアはがん細胞の内在性非コードRNAに作用することでがん進展を抑制させることが分かりました。
（フアイアががん幹細胞へ及ぼす作用）
幹細胞（SC）は、未分化な細胞であり、多くの機能細胞に増殖し分化する可能性を持っています。腫瘍の成長は、がん開始細胞またはがん幹細胞（CSC）と呼ばれる少数の細胞によって促進されることが報告されています。CSCは腫瘍の中に隠れており、再発や薬剤耐性にも寄与します。Notch、Hedgehog（HH）、Wntなどの経路の異常活性化は、CSCの腫瘍形成能に重要な役割を果たすことが証明されています。
Hedgehogシグナル伝達経路は、哺乳類の器官形成、増殖、生存、および自己再生を媒介する重要な部分であることがわかりました。増え続ける証拠により、Hedgehogネットワークが、ホルモン受容体陽性（HR+）やトリプルネガティブ乳がん（TNBC）を含む複数のがんタイプに関与していることが示されています。Wangらは、フアイアはMCF7乳がん細胞のスフェロイド形成を抑制し、CD44+/CD24-細胞の割合を減少させ、幹細胞マーカーを著しく低下させることを報告しました。さらにフアイア治療後、Hedgehog経路に関与する分子、例えばPtch-1、SMO、Gli1、およびGli2が時間依存的に著しく発現を低下させました。 AKTシグナル伝達経路は人間の悪性腫瘍で頻繁に変化し、抗腫瘍療法の潜在的なターゲットとして世界の注目を集めています。活性化されると、リン酸化されたAKTは下流のターゲットであるグリコーゲン合成酵素キナーゼ3β（GSK3β）を調節します。GSK3βの不活化は、総β-カテニンを安定化させ、がん細胞におけるβ-カテニンの蓄積を引き起こすことが証明されています。研究者たちは、Akt/GSK3β/β-カテニンシグナル伝達経路の活性化が、増殖、転移、アポトーシスの回避、および薬剤耐性などの腫瘍の進行に重要な役割を果たしていると仮定しました。2013年、張らによって、フアイアが結腸直腸がん幹細胞の増殖を抑制する効果がβ-カテニンシグナルネットワークと関連していることが初めて報告されました。また、閻らによって、フアイア治療がAKTのリン酸化を顕著にダウンレギュレーションし、時間および用量依存的に総GSK3βの発現レベルを増加させることが証明され、これによりβ-カテニンの抑制が引き起こされることが示されました。しかし、王らの研究では、フアイア抽出物がMCF7細胞株におけるβ-カテニンの発現レベルに顕著な影響を与えないことが示されました。これらの基礎的なメカニズムは今後さらに研究が必要です。
（フアイアが腫瘍オートファジーに及ぼす効果）
オートファジーとは自己分解のことで、古くなったタンパク質や損傷した細胞小器官の除去などすることで細胞の再生を促すことです。この「ハウスキーピング（古くなった細胞のお掃除）」は細胞ががん化しないために必須のプロセスです。現在、オートファジーは有望な治療ターゲットにもなっています。
哺乳類の細胞では、飢餓、酸化ストレスおよび感染にさらされたとき、PI3K/AKT/mTOR/p70S6Kシグナル伝達経路が活性化してオートファジーを起こします。MDA-MB-231、MCF-7、およびMDA-MB-468乳がん細胞株では、フアイア抽出物に添加によりPI3K/AKT/mTOR/p70S6Kシグナル伝達経路の活性化を著しく抑制し、オートファジーを誘導することが証明されました。同様の結果が786-O腎がん細胞でも確認されています。さらに別の研究では、フアイアがタモキシフェンと相乗効果を発揮し、p-AKT、p-mTOR、p-p70S6Kの発現レベルを低下させることでこのシグナル伝達経路を明らかに抑制することが証明されました。オートファジーに関連する他のタンパク質（p-S6、P62、Atg7、Beclin1、Lc3b）もフアイヤの投与後に変化しました。
（フアイアが腫瘍アポトーシスに及ぼす効果）
正常細胞は老化すると、細胞が自らプログラムされた形で自殺するかのように消滅します。この現象をアポトーシスといいます。アポトーシスが正常に作用しなくなると、細胞は増え続け、がん化へ発展するのです。最近の発見により、アポトーシスの回避と発がんに寄与する新しいメカニズムとして、受容体シグナル伝達経路の破壊、B細胞リンパ腫2（Bcl-2）ファミリータンパク質の不均衡、p53変異、アポトーシスタンパク質阻害因子（IAPs）の高発現、およびカスパーゼの低発現が明らかになりました。
Zhangらによって、フアイア抽出物がいくつかのシグナル伝達経路を通じてアポトーシスを誘導できることが証明されました。p53は正常な細胞分裂を誘導するために重要な遺伝子ですが、フアイア抽出物で治療された後、時間依存的、用量依存的にMCF-7乳がん細胞株においてp53タンパクの発現が高まることが分かりました。しかしMDA-MB-231細胞には顕著な効果が見られませんでした。しかし、別の研究では、TIFがMDA-MB-231およびSK-BR-3細胞株の両方でp53の発現を活性化できることが示されています。その他、フアイアで治療された乳がん細胞において、切断型カスパーゼ-3の発現が時間および用量依存性でアップレギュレーションされる一方で、プロカスパーゼ-3は著しく減少し、カスパーゼ-3シグナル伝達経路が顕著に活性化されたことを示しました。
さらに、内因性アポトーシスシグナル伝達経路の重要なプロアポトーシスタンパク質であるBcl-2関連Xタンパク質（Bax）は、フアイア投与後に明らかに増加しました。一方、MDA-MB-231およびMCF-7乳がん細胞株におけるBcl-2の抗アポトーシス効果は消失しました。同様の結果が、線維肉腫HT1080細胞株およびA875メラノーマ細胞株でも観察されました。したがって、フアイヤ投与後、Bcl-2対Baxの比率が著しく減少し、ミトコンドリアを介したアポトーシスが引き起こされました。このようにフアイアによって乳がん細胞のアポトーシス誘導されることを示しています。
（フアイアのがん転移に及ぼす効果について）
乳がん細胞はリンパ節や遠隔臓器へ転移すると生命予後を著しく悪くします。乳がん患者の約10～15％が3年以内に遠隔転移を発症すると報告されています。Zhangらの研究では、トランスウェルアッセイとスクラッチアッセイを用いた侵襲および移動モデルが確立された。フアイヤ水溶液を投与した結果、成功した侵襲/移動細胞の数および創傷閉鎖率が著しく減少し、フアイアの抗転移効果が証明された。他の研究者によっても、フアイヤがタモキシフェンと相乗作用を発揮し、乳がん細胞の移動能力をさらに抑制することが報告されました。
上皮間葉転換（EMT）とはがん細胞が間葉系細胞のように機能分化することであり、EMTによってがん細胞が転移能を獲得すると考えられています。フアイアの抗転移効果はEMT経路に関連しているという報告があります。Snailは転写抑制因子であり、微小環境の信号に応答してEMTのプロセスに関与します。Snailは、ポリコーム抑制複合体2（PRC2）などの因子を募集してヒストンの過メチル化および脱アセチル化を調整し、上皮遺伝子の発現を減少させ、がん細胞の脱落を促進する。これにより、間葉遺伝子およびプロテアーゼ、例えばマトリックスメタロプロテイナーゼ2（MMP2）およびマトリックスメタロプロテイナーゼ9（MMP9）のレベルが上昇します。
Liuらの研究によれば、TIFはSnail、MMP2およびMMP9の発現レベルを減少させることにより、EMT経路を抑制することを証明しました。さらに、MMP2/9は細胞外マトリックスの分解において重要な役割を果たし転移を誘導します。
（フアイアの腫瘍血管新生に対する抑制効果について）
腫瘍の成長には常に新生血管の形成が必要です。血管新生を正常化する治療薬は腫瘍の進行の抑制に必要な治療法です。フアイアは、血管新生プロセスに必要なヒト臍帯静脈内皮細胞（HUVEC）の増殖能力を明らかに抑制することが報告されています。フアイアは活性化された細胞外シグナル調節キナーゼ（ERK）、転写因子p65、c-Jun N末端キナーゼ（JNK）、シグナル伝達及び転写活性化因子3（STAT3）、血管内皮増殖因子（VEGF）のタンパク質レベルを減少させることで、内皮シグナルネットワークを抑制する能力を持っています。これらの現象は、肝細胞癌および子宮頸癌でも確認されています。
（フアイアが免疫反応へ及ぼす効果について）
免疫システムは免疫器官、細胞、さまざまな抗体やサイトカインから成る相互作用するネットワークです。ヒトはこの免疫システムにより早期のがんを見つけて排除することができます。通常がん細胞の周囲の微小環境は免疫抑制的であることが知られており、この腫瘍微小環境はがん進行と転移を促進し、がん細胞が免疫監視から逃れるのを助けることができることが分かっています。そのなかで中心的な役割を果たすのがマクロファージと呼ばれる免疫細胞です。腫瘍へのマクロファージの浸潤は、多くのがんで予後不良や化学療法耐性と関連しています。マクロファージは血管新生を刺激し、腫瘍細胞の移動や侵襲を増加させ、抗腫瘍免疫を抑制することができます。Liらの研究により、フアイアがマクロファージの腫瘍微小環境への浸潤を抑制し、マクロファージ活性を弱めることを証明しました。
（フアイアと従来の治療法と併用する効果について）
パクリタキセルは乳がんに使用される代表的な抗がん剤です。Liuらの研究によれば、パクリタキセルとファイアと併用でがん細胞のアポトーシスを誘導することを報告しました。パクリタキセルはG2/M期の細胞周期停止を誘導し、HuaierはG0/G1期の細胞周期停止を誘導するため、2つの薬剤は相乗効果を生み出し、腫瘍増殖を抑制すると考察しています。また放射線治療においても有効です。Dingらの研究により、フアイア抽出物が細胞周期、細胞分裂、細胞周期段階、およびDNA修復に関連する遺伝子に影響を与えることが基礎研究の中で明らかになりました。これにより、フアイアが乳がん患者の治療において潜在的な放射線増感剤となる可能性を示唆しています。
ファイアに含まれる多糖類（ポリサッカライド）
近年、研究者たちはファイアの主要成分が多糖類であり5種類の機能的な多糖類が存在することを明らかにしました（表1参照）。 2012年に、最初にSunらによって中性水溶性多糖（W-NTRP）が精製されました。この多糖は、QBC939、Sk-ChA-1、およびMZ-ChA-1細胞株に対して抗増殖および免疫調整活性を示しました。W-NTRPは腫瘍細胞の増殖を著しく抑制する一方で、正常細胞（L-929）には細胞毒性を示しませんでした。脾細胞の増殖試験では、W-NTRPがBALB/cマウスから採取したリンパ球の増殖を促進できることが示されました。さらに、W-NTRPはマクロファージの貪食および分泌機能を促進し、免疫システムを強化することができました。 W-NTRPの同定後すぐに、フアイアから抽出された別の多糖HP-1がZhengらによって報告されました。HP-1は、in vitroでの転移抑制効果が明らかであったため、その基礎となるメカニズムがさらに調査されました。HP-1はAEG-1、E-カドヘリン、N-カドヘリンの発現レベルを調節することでEMTを抑制できることが発見されました。別の研究では、HP-1がPI3K/Akt経路の調節を通じて発がんおよび転移を実際に阻止できることが示されました。これにより、HP-1が腫瘍の進行に関連していることが明らかになりました。さらに、HP-1投与後にナチュラルキラー（NK）細胞の活性が著しく向上しました。Baoらによる研究では、HP-1の抗腫瘍活性を説明する新しい仮説が追加されました。HP-1曝露によりG0/G1細胞周期の停止が大きく誘発され、肝細胞株の両方で著しいアポトーシスが引き起こされることが観察されました。さらに、HP-1は3つの主要なMAPK経路を活性化し、AKT/mechanistic target of rapamycin（mTOR）ネットワークを抑制することができました。アポトーシス関連タンパク質Bcl-2、Bax、サバイビンもHP-1の下流ターゲットであることが発見され、これにより腫瘍細胞のプログラムされた細胞死が引き起こされました。最近発表された記事では、HP-1の抗腫瘍効果が肝癌だけでなく、他の癌タイプにも見られることが示されました。先に述べたように、Akt/β-Cateninシグナル伝達経路の活性化は腫瘍進行のほとんどの段階で重要な役割を果たしています。Huらによって報告されたところでは、トリプルネガティブ乳癌（TNBC）細胞において、HP-1は新しく発見されたエストロゲン受容体ERα-36の発現レベルを低下させることができ、したがってERα-36高発現TNBC細胞でのERα-36を介したAKT/β-カテニンシグナルの活性化を抑制し、乳癌幹細胞の抑制につながりました。今年、HP-1が腎癌においてEMTシグナルネットワークを抑制することによりスニチニブとの相乗効果を発揮し、シスプラチンによる腎毒性を防ぐことが報告されました。
Liらは新しい多糖成分TP-1が抗腫瘍治療においても重要な役割を果たすことを発見しました。TP-1は、免疫増強剤として最初に考えられ、リンパ球の増殖を促進し、体内での免疫刺激血清サイトカインの促進が確認されました。さらに、CD4 + T細胞とNK細胞の割合が増加し、一方でCD8 + T細胞は著しく減少しました。研究の進展に伴い、TP-1の血管新生抑制も確認されました。SMMC-7721細胞株を使用して、マウス肝細胞癌モデルが確立されました。研究者たちは、TP-1治療後、移植腫瘍における増殖細胞核抗原（PCNA）の発現が著しく低下することを明らかにしました。微小血管密度（MVD）も減少し、TUNEL陽性細胞の数が対照群と比較して明らかに増加しました。著者のさらなる研究に基づいて、機械的には、TP-1の治療効果は少なくとも部分的には、低酸素誘導因子-1α（HIF-1α）、VEGF、AUF-1、およびAEG-1の調節に起因することが判明しました。これらのシグナル因子の発現レベルの低下により、肝細胞癌を有するマウスにおいて血管新生が抑制され、腫瘍の成長と肺への転移が抑制されました。さらに、Liらの最新の調査により、TP-1の抗腫瘍効果がAUF-1、AEG-1、N-カドヘリンのタンパク質レベルの低下だけでなく、E-カドヘリンおよびmiR-122の発現の増加と関連していることが確認され、以前の結論がさらに裏付けられました。
同時に、Zhouらはフアイヤ多糖類の新しい成分SP1を精製しました。SP1はTP-1といくつかの類似点を共有しています。SP1はin vitroで細胞増殖を抑制するだけでなく、肝細胞癌移植モデルにおいて腫瘍の成長と肺への転移を抑制することもできます。この結論は、MVD、TUNEL陽性細胞の割合、PCNAのレベルによって証明されました。
今年、Yangらによってフアイア水抽出物から分離された新しい免疫刺激性プロテオグリカンTPG-1が発表されました[173]。免疫学の観点から、このチームはTPG-1のマクロファージ刺激効果に焦点を当てました。TLR4（トル様受容体4）依存性のNF-κBおよびMAPKシグナル伝達の活性化を介して、TPG-1で処理することでマクロファージが分泌する可溶性因子が大幅に増加しました。このようにして、TLR4関連のTNFα血清レベルと白血球浸潤の上昇が、H22肝がんを持つマウスにおけるTPG-1の明らかな抗腫瘍活性を説明するかもしれません。将来、フアイア多糖類の新しい研究方法よって、より多くの活性成分が発見されるかもしれません。
（図）フアイアの多糖類の種類と標的部位・機能
（フアイアの毒性）
フアイアの毒性についての研究では、フアイア多糖類が正常な乳房細胞に対して抑制効果がほとんどないことが明らかになりました。SP1は、ヒト乳房上皮細胞の生存率を抑制することなく、乳がん細胞の増殖を顕著に抑制することができました[25]。HP-1はCCK-8アッセイでシスプラチンの腎毒性を軽減することができ、100〜800 µg/mlの濃度ではマウス腎尿細管上皮細胞に対して有意な影響を示さなかった[174]。
ほとんどの動物実験では、マウスに1日あたり50 mgのフアイアを経口投与しました。FDAによって提供された変換方法によると、60 kgのヒトは1日あたり12 gのフアイアを摂取する必要があります。臨床的には、患者は1日3回、8 gのフアイアを含む20 gのフアイア顆粒を摂取しました。Zhuangらの研究[139]では、急性および長期毒性経口試験を通じてフアイアの安全性がin vivoで評価されました。一般に使用される臨床量よりもはるかに高い用量のフアイアを投与した後、実験動物に明らかな毒性反応は観察されませんでした。さらに、フアイア治療群と対照群の間で血液生化学的データおよび臓器の形態学的および組織学的検査に有意差は見られませんでした。フアイアで治療された群では腫瘍増殖が著しく減少しましたが、体重には有意差は見られなかったという結果がWangらの研究[8]でも確認されました。
臨床研究では、フアイアが免疫調節剤として機能すること[155,158,162–164]およびがん患者のKPS（カンザス大学パフォーマンスステータス）を改善することが証明されています[141,143–145,158]。第IV相臨床試験では、フアイア治療後の副作用はすべて軽度で耐えられるものであると報告されました。最も一般的に報告された薬物関連の副作用として、肝機能障害の発生率には2つの群間に統計的な差はありませんでした[130]。
低毒性にもかかわらず、一部の患者はフアイア治療後に特有の味のために吐き気や嘔吐があったと報告されました。
（フアイヤの品質管理）
フアイアから抽出された顆粒は、フアイア膏薬を相対密度1.33に濃縮し、デキストリン、砂糖粉末などの補助材料を加えて混合しています。乾燥後、黄褐色の顆粒になります。中国国家食品薬品監督管理局（SFDA）によって承認され、フアイヤ顆粒は複数の種類のがんに使用できます。Jinke ファイア顆粒はGood Manufacturing Practice（GMP）基準に従って製造され、SFDAの品質保証基準を遵守しています。
（フアイヤの肝がん臨床試験について）
肝細胞癌（HCC）根治的切除後の再発に対するHuaier顆粒の効果：多施設無作為化臨床試験 Chen Q, et al. Gut 2018;67:2006–2016
目的：肝細胞癌（HCC）の根治的外科切除後の補助療法が無再発生存率（RFS）や全生存率（OS）を改善するという証拠はほとんどありません。私たちは、この未解決のニーズに対応するために、サルノコシカケ（ファイア顆粒）の水抽出物の効果を評価する多施設、無作為化、対照、第IV相試験を実施しました。 デザインと結果：合計1044人の患者が2:1の比率でHuaierを受ける群と追加治療を行わない対照群に無作為に割り当てられ、最大96週間治療を受けました。主要な評価項目はRFSでした。二次評価項目にはOSと腫瘍の肝外転移率（ERR）が含まれました。
結果：フアイア群（n=686）と対照群（n=316）の平均RFSはそれぞれ75.5週間と68.5週間でした（HR 0.67; 95% CI 0.55〜0.81）。フアイア群と対照群のRFS率の差は62.39%と49.05%であり（95% CI 6.74〜19.94; p=0.0001）、これによりフアイア群と対照群のOS率はそれぞれ95.19%と91.46%でした（95% CI 0.26〜7.21; p=0.0207）。フアイア群と対照群の腫瘍ERRはそれぞれ8.60%と13.61%でした（95% CI −12.59〜−2.50; p=0.0018）。
結論：HCCの根治的肝切除後の補助療法としてフアイア顆粒の有効性を証明するための、全国規模の多施設共同研究であり、39施設と1044人の患者が参加しました。フアイア群ではRFSの有意な延長と肝外転移の減少が示されました。
＊（補足）根治的HCC切除後に回復し、適格基準を満たした患者は、15日目に無作為に20gのHuaier顆粒を1日3回経口投与される群、または96週間Huaierを受けない群に割り当てられました。
（図）A:無再発生存率 B:全生存率 C:肝外再発率
（フアイヤの乳がん臨床試験について）
肝がんと同様に、フアイヤ顆粒は乳がんの臨床治療においても有効であることが証明されています。
１）トリプルネガティブ乳癌の術後治療におけるファイア顆粒の使用に関する臨床研究
Gland Surgery, Vol 8, No 6 December 2019
方法: 201名のトリプルネガティブ乳がん（TNBC）患者が乳房切除術を受け、2010年10月から2014年9月の間に私たちの病院に入院しました。患者は無作為に実験群（101例）と対照群（100例）に割り当てられました。実験群の患者は、1回20 gのファイア顆粒を1日3回経口投与されました。薬物療法は化学療法中またはその後6ヶ月または18ヶ月で開始されました。対照群はファイア顆粒を受けませんでした。無病生存率（DFS）と全生存率（OS）が主要な結果として測定されました。
結果: フォローアップ期間の中央値は46ヶ月でした。対照群の100人の患者では、5年間のDFSとOSはそれぞれ82%と86%であり、ファイア群の101人の患者では87.1%と90.1%でした。差は統計的に有意ではありませんでした。しかし、対照群のステージIII患者は5年間のDFSが53.8%、OSが65.4%であり、ファイア群のステージIII患者の81.3%および87.5%よりも有意に低い値でした。ファイア群では、6ヶ月の薬物療法を受けた10人の患者が病気の進行を示しましたが、18ヶ月の薬物療法を受けた患者はわずか3人でした。この差も統計的に有意でした。
結論: ファイア顆粒は、特に中期から末期の乳がん患者のDFSとOSを効果的に増加させることにより、TNBC患者の術後補助療法において重要な役割を果たすことができるでしょう。
２．フアイア顆粒が乳癌の予後に与える影響：単施設プロペンシティ・スコア・マッチング後ろ向き研究
Chinese Medical Journal 2025;138(1)
背景：フアイア顆粒は、癌治療に広く使用されている重要な薬用キノコの抽出物です。過去の後ろ向き研究では、乳癌患者に対する有効性が報告されていますが、参加者の属性に偏りをもたらす可能性がありました。したがって、この後ろ向き研究は、乳癌患者の予後に対するフアイア顆粒の有効性を調査することを目的としました。
方法：この単施設コホート研究では、2009年から2017年の間に広東省中医薬病院で診断および治療された乳癌患者が選ばれました。データは後ろ向きに分析され、患者がフアイア顆粒を受け取ったかどうかに基づいて2つのグループに分けられました。選択バイアスを排除するためにプロペンシティ・スコア・マッチング（PSM）法が使用されました。これらのグループの無病生存率（DFS）および全生存率（OS）は、カプラン–マイヤー法およびコックス回帰を使用して比較されました。
結果：この研究には、フアイア群107名と対照群107名の合計214名の早期浸潤性乳癌患者が含まれました。カプラン–マイヤー分析では、2年および5年のDFS率はフアイア群と対照群で有意に異なっていました（ハザード比[HR] 0.495; 95%信頼区間[CI] 0.257–0.953; P = 0.023）。2年および5年のOS率も有意に異なっていました（HR 0.308; 95% CI 0.148–0.644; P = 0.001）。多変量コックス回帰分析では、Huaier顆粒はDFSの改善（HR 0.440; 95% CI 0.223–0.868; P = 0.018）およびOSの改善（HR 0.236; 95% CI 0.103–0.540; P = 0.001）と関連していました。
結論：この後ろ向き研究では、フアイア顆粒が早期浸潤性乳癌患者のDFSおよびOSを改善し、フアイア顆粒を用いた乳癌治療のさらなる前向き研究のための実世界の証拠を提供しました。
（現在進行中の臨床試験）2025年2月1日
１）NCT04790305
Recruiting（患者登録中）
ハイリスク早期トリプルネガティブ乳がんに対するアジュバント治療としてのフアイア顆粒の有効性について
Effect of Huaier Granule on Adjuvant Treatment for High-risk Early-stage Triple-negative Breast Cancer
Conditions
Carcinoma Breast, Invasive Ductal Carcinoma, Breast,Triple-negative Breast Cancer
Locations
Shanghai, China,Hefei, Anhui, China (2),Beijing, Beijing, China, Chongqing, Chongqing, China
（要約）
ファイアの高リスク早期トリプルネガティブ乳がんの術後補助療法に対する有効性を評価することを目的とした、前向き多施設無作為化、並行対照、非盲検試験です。副次的評価項目は長期間にわたるファイア顆粒の安全性と、治療後の生活の質の変化を評価することです。
（詳細な説明）
トリプルネガティブ乳がん（TNBC）は乳がんの10％から20％を占め、診断時にリンパ節浸潤を示すことが多く、生物学的により攻撃的です。TNBCの女性は、早期に遠隔再発する率が高く、他のサブタイプよりも予後不良です。
この研究では、30の研究センターから1072人の高リスク早期トリプルネガティブ乳がんの参加者（観察群536例および対照群536例）が含まれます。ブロック無作為化が採用され、参加者は実験群（ファイア顆粒と従来の治療）および対照群（従来の治療のみ）に無作為に分けられます。すべての参加者は、2年間の治療フォローアップと3年間の生存フォローアップを含む5年間フォローアップされます。治療期間中、参加者は3か月ごとにフォローアップされ、生存フォローアップ期間中は6か月ごとにフォローアップされます。
２）NCT05860907
Not yet recruiting（患者登録終了）
臓器転移のない進行乳がんに対するフアイア顆粒の臨床研究
Clinical Study of Huaier Granules in Patients With Advanced Breast Cancer Without Visceral Metastasis
Conditions
Breast Cancer Stage IV
Locations
Shijia Zhuang, Hebei, China, Zhengzhou, Henan, China, Changsha, Hunan, China (2), Nantong, Jiangsu, China
（要約）
多施設、非盲検、無作為化対照、前向き臨床試験で、内臓転移のない進行乳がん患者に対するフアイア顆粒の有効性と安全性を評価することを目的としています。
詳細な説明
この研究では、少なくとも384人の被験者を含みます。実験群と対照群は2：1の割合で無作為化され、実験群には256人の被験者、対照群には128人の被験者が含まれます。実験群の患者は、フアイア顆粒（10g/回、1日3回）を服用しながら、通常の診断と治療を受けました。一方、対照群は、疾患の進行または耐性が発生するまで、ファイア顆粒を服用しませんでした。
３）NCT05871437
Recruiting（患者登録中）
フアイア顆粒による早期乳がん患者に対する腫瘍マーカー低下への影響
Huaier Granule on Reducing the Level of Tumor Markers in Patients With Early-stage Breast Cancer
Conditions
Early-stage Breast Cancer
Locations
Shanghai, Shanghai, China
（要約）
前向き、単一施設、単一群、第IV相試験は、早期乳がん患者における腫瘍マーカーのレベルを減少させるフアイア顆粒の効果を評価することを目的としています。
詳細な説明
この臨床試験には、2022年10月から2024年10月までに復旦大学上海がん病院乳腺外科を訪れた乳がん手術後の追跡調査段階の患者379名が参加する予定です。再発および転移の場合に腫瘍マーカー（CEA/CA125/CA153）が正常上限値を超えるケースは除外されます。すべての参加者は1年間ファイア顆粒の治療を受けるか、耐え難い毒性が発生する、何らかの理由で試験から離脱する、または死亡するまでのいずれかが先に発生します。
主な研究指標は、腫瘍マーカー（CEA/CA125/CA153）が正常に回復する割合です。
以上で終わりです。
基礎研究はかなり研究資金が入っているものと思われ、ハイレベルで豊富な研究成果になっています。乳がんの他に大腸がんや肺がんなどで臨床試験が同時進行で始まっており、中国生薬フアイア顆粒の有効性について臨床研究のエビデンスを出しつつあります。
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