害虫Sogatella furciferaにおける微生物相の形成には共生生物と環境因子の両方が寄与している
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オリジナル研究論文
Front. 微生物学、2024年1月24日
微生物共生
第14巻-2023年｜https://doi.org/10.3389/fmicb.2023.1336345
この論文は次の研究テーマの一部です。
環境因子による微生物連携の制御
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害虫Sogatella furciferaにおける微生物相の形成には共生生物と環境因子の両方が寄与している
https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2023.1336345/full?utm_source=S-TWT&utm_medium=SNET&utm_campaign=ECO_FCIMB_XXXXXXXX_auto-dlvrit
楊 昆1,2 張 華岳1,2 王 鵬1,2 金 桂秀3 朱 東1,2*1
1中国青島農業大学植物衛生医学学院環境保全型農業病害虫管理山東工学研究センター
2中国、青島市、山東省生物侵入生態安全保障センター
3中国臨沂市農業科学院
はじめに 細菌共生体は節足動物に世界的に広く存在し、宿主の体力や抵抗性に重要な役割を果たしている。コシジロウンカSogatella furciferaではいくつかの共生細菌の感染が確認されているが、S. furcifera内の微生物相に対する環境要因の影響については不明な点が多い。
方法 本研究では、6カ国14地点（中国、タイ、ミャンマー、カンボジア、ベトナム、ラオス）から18個体群から合計142匹のS. furcifera個体を採集し、2bRAD-Mシークエンシングを用いて解析し、S. furcifera個体群の微生物相に対する共生細菌の影響、および細菌群集に対する環境要因の重要な影響を調べた。
結果と考察 その結果、S. furciferaにおいて、共生細菌であるWolbachiaとCardiniumの存在は、Enterobacter、Acinetobacter、Lysinibacillusを含む他の細菌の存在量に負の影響を与え、Wolbachia感染は微生物群集の多様性を有意に減少させた。さらに、経度、緯度、温度、降水量などのいくつかの環境要因が、S. furciferaの共生細菌の存在量と微生物相の多様性に影響を与えた。これらの結果は、S. furciferaの微生物相におけるウォルバキアの重要な役割と、S. furciferaの細菌群集に対する環境要因の複雑な影響を浮き彫りにするものである。
1 はじめに
中国や南アジアにおける重要な害虫として、学名Sogatella furcifera（半翅目：Delphacidae）と呼ばれるコナガ（WBPH）は、農地、特に水田に大きな損失をもたらしている（Savary et al.） S. furciferaはイネから葉茎樹液を吸汁し、イネ宿主に南部イネ黒条矮性ウイルスなどのウイルスを媒介することで被害をもたらす（Zhouら、2008、2018）。過去10年間で、S. furciferaの発生頻度は劇的に増加し、イネ生産における破壊的な害虫となっている（Huら、2015；Wangら、2018）。その高い適応性、長距離移動能力、既存の農薬に対する抵抗性の発達により、S. furciferaの発生を管理することはますます困難になっている（Wang et al.） 残留農薬問題の深刻化と相まって、S. furciferaを含む害虫による被害を軽減するための新規かつ効率的な方法の開発が急務となっている。
微生物群集、特に共生細菌を含むバクテリアは、宿主節足動物の発生、体力、繁殖力、抵抗力において重要な役割を果たしている（Douglas, 2009; McFall-Ngai et al.） これらの共生細菌は、一次共生細菌（義務的共生細菌）と二次共生細菌（通性共生細菌）の2つに分類され、主に宿主内の細菌細胞内に存在し、宿主節足動物に複雑な影響を及ぼす（Werrenら、2008；Zengら、2018；Yangら、2022）。前者は宿主無脊椎動物の発生と生存に不可欠である。例えば、共生生物Portieraはコナジラミの宿主に必須アミノ酸（EAA）とビタミンB群を供給し（Wang et al.
無脊椎動物で最も有名な共生生物であるウォルバキアは、1924年に蚊で初めて発見された（Hertig and Wolbach, 1924）。興味深いことに、この菌は節足動物全種の少なくとも66%に感染する（Werren, 1997; Miao et al.） フィラリア線虫では、ウォルバキアは宿主線虫の発育と繁殖に不可欠な義務的相互作用生物とみなされている（Taylor et al.） 以前は無脊椎動物における生殖寄生と考えられており、細胞質不和合性、雌化、単為生殖、雄殺しなどの現象を通じて宿主の生殖を操作することができたが（Werren et al., 2008）、最近の研究では、ウォルバキアがもたらす利益が立証されている（Zug and Hammerstein, 2015）。また別の研究では、小型プランクトンの微生物群集に対するウォルバキアの影響を裏付けている（Duan et al.） しかし、節足動物におけるウォルバキアと細菌群集の複雑な相互作用については、さらなる調査が必要である。
節足動物の共生細菌を含む微生物群集は、様々な生物的・生物外的要因の影響を受ける。例えば、高温はコナジラミの共生細菌の力価や細菌群集の多様性に大きな影響を与える（Yang et al.） 同様に、無脊椎動物宿主の食性は微生物群集の構造に大きく影響し（Santo Domingoら、1998；Colmanら、2012）、温度と湿度の両方が細菌群集に影響を与える（Beharら、2008）。さらに、以前の研究では、宿主の遺伝的背景が微生物叢に重大な影響を及ぼすことが報告されている（Suzuki et al.） 興味深いことに、共生生物の存在は微生物群集に大きな影響を及ぼす。共生生物は比較的大きな空間を占め、他の細菌と栄養分の奪い合いをする。先行研究によると、スピロプラズマの感染は、同じ宿主におけるウォルバキアの力価を著しく低下させる（Goto et al., 2006）。さらに、ウォルバキアやカルディニウムなどの共生細菌は、宿主であるソガテラ・ファーシフェラのマイクロバイオームの多様性を低下させる可能性がある（Li et al.、2022）。共生細菌がS. furciferaの微生物叢に及ぼす複雑な影響については、さらなる調査が必要である。
2bRAD-Mシーケンシングは、低バイオマスのマイクロバイオームを高い忠実度で種レベルで効率的に検出できる新しい手法である（Sun et al.） 近年、S. furciferaによる被害はアジアや中国を中心に劇的に急増している。しかし、共生細菌を含むS. furciferaの細菌群集と環境要因との間の複雑な相互作用は、まだ十分に理解されていない。さらに、共生細菌をS. furciferaの生物防除に応用する可能性についても探求が必要な分野である。本研究では、S. furciferaの微生物群集の形成に寄与する重要な因子を解明するために、アジア6カ国から入手したS. furciferaの18個体群を2bRAD-Mシーケンスに供した。さらに、この包括的な研究では、共生生物と環境因子が細菌群集に及ぼす影響についても検討した。
2 材料と方法
2.1 中国および南アジアにおけるSogatella furcifera個体群の収集
本研究では、中国、タイ、ミャンマー、カンボジア、ベトナム、ラオスの6カ国14地点から、共生細菌、細菌群集、環境要因の関係を明らかにするために、18個体群から合計142個体のS. furciferaを採集した。各S. furcifera個体群は少なくとも6つの独立したサンプルから構成されていた。すべてのS. furciferaサンプルは100%アルコールで保存され、その後2bRAD-Mシーケンス用に発送された。サンプルに関する情報は表1および補足表S1に詳述している。
表1
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表1. 本実験で用いたSogatella furcifera個体群の採集情報。
2.2 DNA抽出と2bRAD-Mシーケンス
S. furciferaの細菌群集は、2bRAD-Mシーケンス法を用いて解析した。2bRAD-M シークエンシングとライブラリー構築は、Qingdao OE Biotech Co. (Ltd.（青島、中国）により、以前に確立されたプロトコール（Wang et al. 次に、得られたDNA断片を特定のアダプターでライゲーションした。5μLの消化DNAと、0.2μMの各アダプターと800UのT4 DNAリガーゼ（NEB）を含む10μLのライゲーションマスターミックスを混合し、4℃で12時間ライゲーション反応を行った。
ライゲーション後、産物をPCR増幅し、得られたDNAを8%ポリアクリルアミドゲルで電気泳動した。約100bpのバンドを切り出し、DNA断片をDEPC水中で4℃、12時間拡散させた。プラットフォーム特異的バーコードを持つプライマーを用いてPCR試験を行い、サンプル特異的バーコードを導入した。各PCRサンプルは合計20μLで、25ngのゲル抽出PCR産物、0.2μMのフォワードおよびリバースプライマー、0.3mMのdNTPミックス、0.4UのPhusion high-fidelity DNAポリメラーゼ（NEB）、および1×Phusion HFバッファーが含まれていた。PCR増幅と電気泳動の後、PCR産物をQIAquick PCR purification kit (50) (Qiagen)を用いて精製し、Illumina Nova PE150プラットフォームで塩基配列を決定した。
2.3 2bRAD-Mシーケンス結果のデータ解析
2bRAD-M解析を行うために、真菌、細菌、古細菌の173,165種からなるNCBIデータベースの微生物ゲノムデータを採用した。サンプルの断片化には16種類の2B型制限酵素を使用し、この過程でPerlスクリプトを使用した。その後、RefSeq (GCF)番号を用いて、分類学的データを含む微生物ゲノム情報を2bRAD-Mタグに付与した。すべてのGCFで一度だけ出現するユニークな2bRADタグを種特異的2bRAD-Mマーカーとして選択し、参照データベースを形成した。相対存在量0.0001（0.01%）の検出閾値がデフォルトとして設定された（Franzosa et al.）
各細菌の相対存在量を計算するために、品質管理後の全サンプルから得られた2bRADタグを、組み込みのPerlスクリプトを使用して、26,163の微生物種に固有のタグを含む2bRADマーカーデータベースに対してマッピングした。種の同定における偽陽性を軽減するため、特定のサンプル内で同定された種ごとに G スコアが計算された。このスコアは、ある生物種に属する2bRADマーカーのリードカバレッジの調和平均と、この生物種について可能な2bRADマーカーの総数から導出され、エラーを最小限に抑えながら生物種を同定するために採用された。偽陽性の微生物種発見を防ぐため、閾値Gスコアを5に設定した(Sun et al., 2022)。
Gscorespeciesi=Si×ti------√。
S: サンプル内の種iに属するすべての2bRADマーカーに割り当てられたリードの数。
T：サンプル内で配列決定された種iのすべての2bRADマーカーの数。
各生物種のすべての2bRADマーカーの平均リードカバレッジは、ある配列決定深度でサンプル内に存在する生物種の個体数を表すために計算された。そして、ある種の相対的存在量は、サンプル内で検出された既知の種の個体総数に対する、その種に属する微生物個体数の比率として計算された。
Relativeabundancespeciesi=SiTi/∑ni=1SiTi/。
S: サンプル内の種iのすべての2bRADマーカーに割り当てられたリードの数。
T：種iのすべての理論的2bRADマーカーの数。
さらに、年平均気温、年間降水量、経度、緯度、標高の5つの環境因子を解析した。これらの因子のデータはWorldClimのウェブサイトからダウンロードした1。多様性・豊度指数と共生生物感染に対する気候と地理的要因の影響は、Satorra-Bentler補正を用いた2つの構造方程式モデル（SEM）を用いて記述した。異分散性を制限するため、SEMでは「降水量」の対数値を用いた。SEMモデルは、低いAIC値に基づいて冗長なパスウェイを系統的に除外した後、p値>0.05、CFI>0.95の場合に許容可能と判断した。各パラメーターを標準化し、分散を排除するために、SEM係数は標準化変換によって推定された。解析に先立ち、カルディニウムの存在量（図1左パネル）、ウォルバキアの存在量（図1右パネル）、サンプルの微生物多様性（図2）のデータは、コルモゴロフ・スミルノフ検定とレヴェーヌ検定を用いて正規性検定を行い、群分散の均一性を評価した。正規分布を示すデータは、一元配置分散分析（one-way ANOVA）とポストホックTukey HSDを用いて分析した。カルディニウムの個体数、ウォルバキアの個体数、多様性のデータが正規分布に合致しない場合は、Kruskal-Wallis検定とDunn検定、多重比較のためのBonferroni補正を用いて分析した。統計解析はすべてSPSS 21.0を用いて行った。Bray-Curtis標本間距離と分類確率を示すPCoAプロットは、QIIMEソフトウェア（Caporaso et al.） SPSS 21.0を用いて行ったピアソン相関分析は、異なる共生生物と多様性指標との関係を探るために用いた。さらに、すべてのグラフ表示はGraphPad Prism 9.0.0を用いて作成した。
図1
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図1. 2bRAD-Mシークエンシングによる、18の地理的位置におけるソウガネズミのCardinium（左パネル）、Wolbachia（右パネル）、および採集場所（中央パネル）の相対的感染量。共生生物感染データは正規分布に従わないため、様々なS. furcifera個体群におけるウォルバキア存在量の差は、SPSS 21.0による多重比較のためのボンフェローニ補正を用いたクラスカル・ワリス検定およびダン検定によって分析した。
図2
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図2. 2bRAD-Mシーケンス結果に基づく、アジアで収集された18個体群にわたるSogatella furciferaの微生物群集の存在量。上位15種の属レベルの相対的な存在量を、個体群ごとに示した。
3 結果
3.1 異なるSogatella furcifera個体群における細菌群集の組成
本研究では、中国から9個体群、南アジア地域から9個体群の合計18個体群を解析した。すべてのS. furcifera個体群で同定された主な細菌共生体は、WolbachiaとCardiniumであった。興味深いことに、前者はほぼすべてのS. furcifera個体群において最も豊富な細菌であり、すべてのS. furciferaサンプルに存在した。特に、CS（85.95±2.92％、Mean±SEM）とFN（89.26±3.01％、Mean±SEM）の2つの中国個体群、およびVE（86.02±1.57％、Mean±SEM）とSA（86.02±3.58％、Mean±SEM）を含むラオスの全個体群では、ウォルバキアの相対存在量が80％を超えていた。それにもかかわらず、ウォルバキア量には個体群間で有意なばらつきが観察された。一方、中国産のS. furciferaの3個体群（JY、YT、TC）はウォルバキア存在量が最も低く、FN、VE、SAなどのウォルバキアに富む個体群よりも有意に低かった（図1右パネル）。S. furciferaではカルディニウムが2番目に多い細菌として浮上した（図1左パネル）。KO（63.88±14.38％、Mean±SEM）、RO（59.96±14.04％、Mean±SEM）、LU（52.50±15.74％、Mean±SEM）、および中国のYT（27.18±10. 38%, 平均±SEM) カルディニウムが優占共生生物であり、KO個体群におけるその存在量はJY個体群におけるそれ（11.72±7.78%, 平均±SEM）よりも有意に高かった（p < 0.05, Kruskal-Wallis検定）。また、JY集団ではWolbachiaの存在量は1％未満であったが、Cardiniumの存在量は最も高かった（56.59±11.90％、Mean±SEM）。さらに、典型的なコナジラミと共生する主要共生生物Portieraも、TC、KO、VEなど、いくつかのS. furcifera個体群から検出された（図3）。すべてのS. furcifera個体群の細菌群集の違いを調べるために主成分分析を行った結果、FN個体群およびJY個体群のS. furcifera個体群では、他のサンプルと比較して明確な微生物群集が存在することが明らかになった（補足図S1）。
図3
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図3. アジアで採集されたSogatella furcifera MED全18個体群のアルファ多様性。シャノン指数（A）、シンプソン指数（B）、チャオ1指数（C）はそれぞれ2bRAD-M配列決定結果に基づいて存在する。多様性データは正規分布に従わないため、SPSS 21.0を用いてKruskal-Wallis検定とDunn検定（多重比較のためのBonferroni補正付き）で分析した。
3.2 地理的に異なるSogatella furcifera個体群の微生物多様性
異なるS. furcifera個体群間の微生物群集の変動を明らかにするために、各S. furcifera個体群について、Shannon、Simpson、Chao1を含むα多様性指数を算出した。すべての個体群の3つのアルファ指数が正規分布に従わないことを考慮し、多重比較にはクラスカル・ワリス検定とダン検定（ボンフェローニ補正付き）を採用した（図2）。興味深いことに、ウォルバキア存在量の低い個体群は、高い個体群と比較して、細菌群集のアルファ多様性が高かった。具体的には、JY、TC、YTのようなウォルバキア存在量の低い集団は、VE、SA、CX、FNのようなウォルバキア存在量の高い集団と比較して、有意に高いシャノン指数とシンプソン指数を示した（図2）。2bRAD-Mシーケンスデータを用いたSogatella furciferaの異なる個体群のUPGMA階層クラスター図を示し（補足図S2）、2bRADシーケンス結果を用いたSogatella furciferaの異なる個体群の系統樹を構築した（補足図S3）。
3.3 Sogatella furciferaの他の細菌および微生物多様性に対するWolbachiaとCardiniumの影響
ピアソン分析を用いて、S. furciferaにおける共生細菌と他の細菌との相関を評価した。図4Aに示すように、ウォルバキアの存在は、エンテロバクター、アシネトバクター、リシニバチルスを含む様々な細菌の存在量にマイナスの影響を与えた。特に、ウォルバキアはS. furciferaのPortieraの存在量に有意かつマイナスの影響を与えた（r = -0.518、p < 0.05、ピアソン分析）。ウォルバキアの存在量はカルディニウムの存在量と負の相関があったが、その相関は統計的に有意ではなかった（r = -0.451、p = 0.06、ピアソン分析）。一貫して、カルディニウムはシュードモナスの存在量に有意に正の影響を与え（r = -0.804、p < 0.001、ピアソン分析）、相関は統計的に有意ではなかったが、他の様々なバクテリアの存在量にも影響を与えた（図4B）。
図4
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図4. 2bRAD-Mシーケンス結果に基づくピアソン相関分析（SPSS 21.0）による、Sogatella furciferaの全18個体群における他の主要13菌の割合とウォルバキアの割合（A）またはカルディニウムの割合（B）との関係。各直線回帰プロットのr値とp値を示す。「ns "は有意でないことを意味し、*p < 0.05、**p < 0.01、***p < 0.001は2つの比較群で有意差があることを示す。
注目すべきことに、ピアソン分析では、ウォルバキアの存在がS. furciferaの3つの多様性指数、すなわち、Shannon指数（r = -0.834、p < 0.001、ピアソン分析）、Simpson指数（r = -775、p < 0.001、ピアソン分析）、Chao1指数（r = -0.750、p < 0.001、ピアソン分析）に有意かつマイナスの影響を与えた（図5）。カルディニウム感染も、相関関係は有意ではなかったが、多様性指数にマイナスの影響を与えた（補足図S4）。
図5
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図5. 2bRAD-M配列決定結果に基づくピアソン相関分析（SPSS 21.0）による、Sogatella furciferaの全18個体群におけるウォルバキアの存在量とShannon多様性指数（A）、Simpson指数（B）、Chao1指数（C）との関係。各直線回帰プロットのr値とp値を示す。
3.4 Sogatella furciferaの共生細菌を含む細菌量に対する環境要因の影響
5つの環境因子（年平均気温、年間降水量、緯度、経度、高度）がS. furciferaの微生物相に及ぼす影響をピアソン分析によって求めた。S. furciferaにおけるWolbachiaとCardiniumの存在量は年平均気温とともに増加したが、気温とこれら2つの共生体の存在量の間には有意な相関は見られなかった。それにもかかわらず、気温はエンテロバクター、リシニバチルス、アシネトバクターなど多くの細菌の存在量に有意にマイナスの影響を与えた（図6A）。降水量はウォルバキアの存在量に有意な正の影響を与えた（r = 0.489、p < 0.05、ピアソン分析）（図6B）。緯度は多くの細菌の存在量と有意かつ正の相関があり、カルディニウムとウォルバキアには負の相関が見られたが、後者については有意な差は見られなかった（図6C）。一方、経度はウォルバキアの存在量と有意かつ負の相関があり（r = 0.750, p < 0.001, ピアソン分析）、S. furciferaの他のバクテリアの存在量とは正の相関があった（図6D）。最後に、標高はS. furciferaの細菌量に有意な影響を与えなかった（補足図S5）。
図6
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図6. 2bRAD-Mシーケンス結果に基づくピアソン相関分析（SPSS 21.0）による、Sogatella furcifera全18個体群における主要14菌の割合と年平均気温（A）、年降水量（B）、緯度（C）、経度（D）との関係。各直線回帰プロットのr値とp値を示す。「ns "は有意ではないことを意味し、*p < 0.05; **p < 0.01; ***p < 0.001。
SEM分析では、降水量がWolbachiaの存在量に有意に影響すること（r = 0.400, z = 1.967, p < 0.05, SEM）と、緯度がCardiniumの存在量に負の影響を与えること（r = -3.021, z = -2.498, p < 0.05, SEM）が検証された。ピアソン分析とは対照的に、SEM分析ではウォルバキアとカルディニウムの間に有意な負の相関が見られた（r = -0.87, z = -2.785, p < 0.01, SEM）。最後に、温度はウォルバキア個体数に数値的に正の影響を与え、カルディニウム個体数には負の影響を与えた（図7）。
図7
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図7. 環境要因（年平均気温、年間降水量、経度、高度、緯度を含む）と共生生物（ウォルバキアとカルディニウムを含む）の存在量に関する構造方程式モデル（SEM）のパス図。統計的に有意な負のパスは青い矢印で、正のパスは赤い矢印で示す。各ボックスのr値は、入力矢印によって説明されるその変数の変動量を示す。矢印の横の数字は非標準化勾配である。
3.5 S. furciferaの微生物多様性に対する環境要因の影響
さらに、S. furciferaの微生物相多様性に対する環境要因の影響を調べた。ピアソン分析によると、緯度と経度はS. furciferaの細菌群集の3つの多様性指数（シャノン指数、シンプソン指数、チャオ1指数）すべてに正の影響を及ぼしたが、標高は微生物相の多様性にわずかに負の影響を及ぼした（図8）。一方、SEM分析では、標高がシャノン指数に負の影響を及ぼし（r = -0.806, z = -2.096, p < 0.05, SEM）、これはピアソン分析の結果とは異なっていた（図8G）。SEM分析では、気温がシャノン指数（r = -1.879, z = -2.527, p < 0.05, SEM）とシンプソン指数（r = -3.189, z = -3.493, p < 0.001, SEM）の両方にマイナスの影響を与えることが明らかになった（図9）。
図8
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図8. Sogatella furciferaにおける微生物相の多様性指標と環境要因の関係。緯度とシャノン多様性指数（A）、シンプソン指数（B）、チャオ1指数（C）、経度とシャノン多様性指数（D）、シンプソン指数（E）、チャオ1指数（F）、高度とシャノン多様性指数（G）、シンプソン指数（H）、チャオ1指数（I）の関係をそれぞれ示し、すべての分析はピアソン相関分析（SPSS 21. 0）を用いた。各直線回帰プロットのr値とp値を示す。
図9
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図9. 環境要因（年平均気温、年降水量、経度、高度、緯度を含む）と多様性指数（シャノン指数、シンプソン指数を含む）の構造方程式モデル（SEM）のパス図。統計的に有意な負のパスは青い矢印で、正のパスは赤い矢印で示す。各ボックスのr値は、入力矢印によって説明されるその変数の変動の量を示す。矢印の横の数字は標準化されていない傾きである。
4 考察
共生細菌は宿主の生物学、生態学、進化において重要な役割を果たしており、様々な環境因子が無脊椎動物宿主の細菌群集に大きな影響を与えている。ここでは、共生細菌がS. furcifera個体群の微生物相に及ぼす影響と、環境因子がS. furciferaの細菌群集に及ぼす有意な影響について解析した。その結果、S. furciferaに共生細菌であるWolbachiaとCardiniumが存在すると、他の多くの細菌の存在量に悪影響を及ぼすことが明らかになった。さらに、Wolbachiaの感染はS. furciferaの微生物群集の多様性を著しく減少させた。経度、緯度、温度、降水量などのいくつかの環境因子が、S. furciferaにおける共生細菌の存在量と微生物群集の多様性に影響を与えることがわかった。
今回の研究では、S. furciferaの細菌群集組成は豊富で、主に2つの優勢共生生物、すなわちウォルバキアとカルディニウムから構成されていた（図3）。これらの結果は、S. furciferaの微生物相に関する先行研究の結果（Liら、2020、2021、2022）と一致している。注目すべきは、S. furciferaの微生物叢における主要共生生物Portieraの存在で、RO（5.03±10.38％、平均±SEM）およびKO（2.73±1.40％、平均±SEM）などの様々な集団において有意な感染率が認められた（図3）。異なる節足動物種間での共生体の水平伝播は十分に立証されている（Werrenら、2008；Zhangら、2016）。研究により、異なる葉茎樹液食性昆虫種間で水平伝播が起こりうることが立証され、S. furcifera内にPortieraが存在することが説明された（Gonella et al., 2015）。これまでの研究で、無脊椎動物のマイクロバイオームに対する遺伝的背景の重要な影響が確認された（Suzuki et al., 2019; Gupta and Nair, 2020）が、S. furciferaの遺伝的系統樹とS. furciferaのマイクロバイオームのUPGMA階層クラスター図との間に直接的な関係は見られなかった（補足図S2, S3）。
節足動物では、さまざまな細菌間、特に共生細菌間の相互作用が複雑である。具体的には、ある共生細菌の存在は一般的に他の共生細菌の感染パターンに影響を与える（Evans and Armstrong, 2006; Zhao et al., 2018; Fromont et al., 2019; Duan et al., 2020）。この現象は、共生体が主に無脊椎動物宿主内の細菌細胞と生殖組織に限定され、限られた栄養と空間をめぐる競争につながることを考えれば、驚くべきことではない（Engel and Moran, 2013; Douglas, 2015; Yang et al.） 例えば、Laodelphax striatellusでは、ウォルバキアの感染は宿主内の154の他の細菌属の存在量に悪影響を及ぼす（Duan et al.） コナジラミではCardiniumとHamiltonellaのような共生細菌間の相反する相互作用が観察されており（Zhao et al., 2018）、ミツバチでは他の細菌が主要共生細菌であるPaenibacillus幼虫の発育速度を低下させる（Evans and Armstrong, 2006）。私たちの研究でも同様の結果が得られた。ウォルバキアは13の主要細菌属の存在量に負の影響を及ぼし、カルディニウムは11の他の属の存在量に負の影響を及ぼした（図4）。この観察結果は、S. furciferaにおける細菌間の競争関係を示唆している。しかし、カルディニウムの感染はシュードモナスとプロテウスの存在量と正の相関があり、カルディニウムとこれら2つの細菌の間に協力的な相互作用があることを示していた（図4B）。同様の相互作用は他の研究でも報告されている。例えば、ミバエDrosophila neotestaceaにおけるウォルバキアの存在は、スピロプラズマの感染を促進する（Fromont et al.） Laodelphax striatellusでは、ウォルバキアの感染がスピロプラズマやラルストニアなど他の細菌の存在量を増加させる（Duan et al.） このような細菌間、特に共生細菌間の複雑な相互作用については、さらなる研究が必要である。
共生細菌は無脊椎動物の微生物群集を形成する上で極めて重要な役割を果たしており、必ず宿主の微生物叢構造に影響を与える。共生微生物の感染は、節足動物の宿主における細菌の多様性の減少につながることが多い（Duan et al.） 本研究では、ウォルバキアの感染はS. furciferaの細菌群集の多様性を有意に減少させた（図5）。この知見は、ウォルバキアの存在が蚊の常在細菌の多様性を減少させた（Audsley et al.） 同様の微生物多様性の減少は、小型褐色オオヨコバイLaodelphax striatellus (Zhang et al., 2020)やショウジョウバエDrosophila melanogaster (Ye et al., 2017)でも観察されている。これらの研究は、共生生物が節足動物の細菌群集に悪影響を及ぼすことを強調している。
節足動物の微生物群集に対する環境要因の影響は、これまでの研究でも検討されてきた。世界の無脊椎動物に関する研究では、温度が宿主節足動物におけるウォルバキアとカルディニウム感染の発生に大きく影響することが示された（Charlesworth et al.） 共生生物に対する同様の温度効果は、他の研究でも裏付けられた（Corbin et al.） しかし、本研究では、共生生物（カルディニウムとウォルバキア）に対する温度の影響はS. furciferaでは有意ではなく（図6A、7）、S. furciferaの共生生物感染に対する温度の影響は弱いことが示唆された。他の環境要因も宿主の共生生物感染に影響を与える。例えば、ハダニ類のTetranychus truncatusでは、ウォルバキア感染は年平均気温に有意に影響されたが、カルディニウムとスピロプラズマの感染率は標高と相関していた（Zhu et al.） さらに、イシトンボの細菌群集は地理的距離に有意に影響された（Zhuら、2022）。ここで、S. furciferaにおける多数の細菌の存在量は環境要因に影響され、ウォルバキアの存在量は降水量と経度に有意に影響され、カルディニウムの存在量は環境に有意に影響されなかった（図6および補足図S3）。ウォルバキアとカルディニウムに対する環境の影響の差については、さらなる調査が必要である。
まとめると、S. furciferaの18個体群を対象とした我々の2bRAD-Mシーケンス解析は、アジアのS. furcifera個体群における細菌群集構造、環境要因、共生細菌の関係について、新規かつ包括的な視点を提供するものである。我々の観察結果は、宿主であるコナジラミ内のウォルバキアとカルディニウム共生細菌が互いに影響し合い、他の細菌の存在量に悪影響を及ぼすという信頼できる証拠を示している。重要なことは、ウォルバキアの存在が微生物の多様性に悪影響を及ぼし、共生細菌と微生物叢の多様性の両方が様々な環境要因に大きく影響されたことである。しかし、地球規模の生態学的タイムスケールにおいて、環境因子がS. furciferaの異なる個体群における細菌群集の多様性に影響を与えるメカニズムを解明するためには、さらなる研究が必要である。
データの利用可能性に関する声明
本研究で発表された原著論文は一般に公開されている。このデータはこちらからご覧いただけます： NCBI, PRJNA1055281.
倫理声明
本原稿は、研究に関する倫理的承認を必要としない動物を用いた研究を紹介するものである。
著者貢献
KY：構想、データ管理、資金獲得、調査、方法論、執筆（原案）、執筆（校閲・編集）。H-YZ：調査、方法論、バリデーション、執筆-校閲・編集。PW：監修、原案執筆。G-XJ：形式分析、検証、概念化、執筆-原案、執筆-校閲・編集。DC： 概念化、形式分析、資金獲得、監修、検証、執筆-原案、執筆-校閲・編集。
資金提供
著者は、本論文の研究、執筆、および/または発表のために金銭的支援を受けたことを表明する。本研究は、中国山東省泰山奨学基金会（tstp20221135）、山東省現代農業技術産業システム（SDAIT-17-07）、青島農業大学高級人材基金（663-1121025）の支援を受けた。
利益相反
著者らは、本研究が利益相反の可能性があると解釈される商業的または金銭的関係がない状態で実施されたことを宣言する。
発行者注
本論文で表明された主張はすべて著者個人のものであり、必ずしも所属団体や出版社、編集者、査読者の主張を代表するものではない。本論文で評価される可能性のあるいかなる製品、またはその製造元が主張する可能性のある主張も、出版社によって保証または支持されるものではない。
補足資料
本論文の補足資料は、https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2023.1336345/full#supplementary-material。
脚注
参考文献
Audsley, M. D., Seleznev, A., Joubert, D. A., Woolfit, M., O'Neill, S. L., and McGraw, E. A. (2018). Wolb-achia感染はイエネズミm-蚊の成虫における常在細菌の相対量を変化させるが、幼虫は変化させない。Mol. Ecol. 27, 297-309.
このような研究は、日本ではほとんど行われていない。
Behar, A., Yuval, B., and Jurkevitch, E. (2008). 地中海ミバエの微生物叢の群集構造：季節的・空間的変動源。Isr. J. Ecol. doi: 10.1080/15659801.2008.10639612.
Google Scholar
Caporaso, J. G., Kuczynski, J., Stombaugh, J., Bittinger, K., Bushman, F. D., Costello, E. K., et al. QIIMEにより高スループットコミュニティシーケンスデータの解析が可能になった。Nat. Doi: 10.1038/nmeth.f.303.
PubMedアブストラクト｜全文｜Google Scholar
Charlesworth, J., Weinert, L. A., Araujo, J. E. V., and Welch, J. J. (2019). Wolbachia, Cardinium and climate: an analysis of global data. Biol. Lett. 15:20190273. doi: 10.1098/rsbl.2019.0273.
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Colman, D. R., Toolson, E. C., and Takacs-Vesbach, C. D. (2012). 食性と分類学は昆虫の腸内細菌群集に影響を与えるか？Mol. Ecol. 21, 5124-5137. doi: 10.1111/j.1365-294X.2012.05752.x.
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Corbin, C., Heyworth, E. R., Ferrari, J., and Hurst, G. D. D. (2016). 温度が変化する世界における遺伝性共生生物。遺伝118, 10-20.
PubMedアブストラクト｜全文｜Google Scholar
Douglas, A. E. (2009). 昆虫の栄養生態学における微生物の側面。Funct. Ecol. 23, 38-47. doi: 10.1111/j.1365-2435.2008.01442.x.
全文｜Google Scholar
Douglas, A. E. (2015). Multiorganismal insects: diversity and function of resident microorganims. Annu. Rev. Entomol. 60, 17-34. doi: 10.1146/annurev-ento-010814-020822
パブコメ抄録｜全文｜Google Scholar
Duan, X. Z., Sun, J. T., Wang, L. T., Shu, X. H., Guo, Y., Keiichiro, M., et al. 野生Laodelphax striatellus個体群における微生物群集を変化させるウォルバキア菌の最近の感染。Microbiome 8:104. doi: 10.1186/s40168-020-00878-x
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Dunbar, H. E., Wilson, A. C., Ferguson, N. R., and Moran, N. A. (2007). アブラムシの耐熱性は、共生細菌の点突然変異によって制御される。PLoS Biol.
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Engel, P., and Moran, N. A. (2013). 昆虫の腸内細菌叢-構造と機能における多様性-. FEMS Microbiol. DOI: 10.1111/1574-6976.12025.
Google Scholar
Evans, J. D., and Armstrong, T. N. (2006). ミツバチ細菌共生生物間の拮抗的相互作用と疾病への影響。BMC Ecol. 6:4. doi: 10.1186/1472-6785-6-4.
ミツバチの細菌性共生生物間の相互作用と病害への影響.
Franzosa, E. A., McIver, L. J., Rahnavard, G., Thompson, L. R., Schirmer, M., Weingart, G., et al. メタゲノムとメタトランスクリプトームの種レベルの機能-alプロファイリング。Nat. doi: 10.1038/s41592-018-0176-y
メタゲノム、メタトランススクリプトーム、メタゲノム解析
Fromont, C., Adair, K. L., and Douglas, A. E. (2019). ショウジョウバエの自然個体群におけるマイクロバイオミー、ウォルバキア、宿主機能形質の相関と因果関係。Mol. Ecol. 28, 1826-1841. doi: 10.1111/mec.15041
抄録｜全文｜Google Scholar
Gonella, E., Pajoro, M., Marzorati, M., Crotti, E., Mandrioli, M., Pontini, M., et al. Plant-mediated interspecific horizontal transmission of an intracellular symbiont in insects. 論文タイトル：Sci. Rep.
抄録｜全文｜Google Scholar
後藤慎一郎・安仏秀樹・深津哲也 (2006). 同じ昆虫宿主に共生するWolbachiaとSpiroplasmaの非対称的相互作用。Appl. Environ. Microbiol. 72, 4805-4810.
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Gupta, A., and Nair, S. (2020). 昆虫-マイクロバイオーム相互作用のダイナミクスが宿主と微生物共生体に与える影響。Front. Microbiol. 11:1357.
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Hertig, M., and Wolbach, S. B. (1924). 昆虫におけるリケッチア様微生物の研究。J. Med. 研究 44, 329-374.7.
PubMed Abstract｜Google Scholar
Hu, S. J., Liu, X. F., Fu, D. Y., Huang, W., Wang, X. Y., Liu, X. J., et al. 中国雲南省におけるSogatella furcifera (Hemiptera: Delphacidae)の越冬個体群の分布予測と主要影響気候要因の分析．日本昆虫学会誌15:148.
Google Scholar
Huang, Y. X., and Qin, D. Z. (2018). Saccharosydnini (Hemiptera: D-elphacidae: Delphacinae)族初のマイトゲノムと3種の優勢なイネヨトウの系統樹。Eur. J. Entomol. 115:242. doi: 10.14411/eje.2018.023
全文｜Google Scholar
Li, F., Li, P., Hua, H., Hou, M., and Wang, F. (2020). シラホシテントウSogatella furcifera（Hemiptera: Delphacidae）の細菌共生体の多様性、組織局在性および感染様式。Microb. Ecol. 本論文では、シロイヌナズナの細菌共生機構を明らかにすることを目的とした。
抄録｜全文｜Google Scholar
Li, T. P., Zha, S. S., Zhou, C. Y., Xia, X., Hoffmann, A. A., and Hong, X. Y. (2021). 新たに導入された2種類のウォルバキア内共生体は、細胞宿主の競争力と代謝再反応の違いを引き起こす。Appl. Environ. Microbiol. 87:e0147921.
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Li, T. P., Zhou, C. Y., Wang, M. K., Zha, S. S., Chen, J., Bing, X. L., et al. (2022)内共生生物はマイクロバイオームの多様性を減少させ、プランツホッパーSogatella furciferaにおける宿主の代謝と繁殖力を改変する。このような背景のもとで、微生物が宿主の代謝や繁殖力を変化させることを明らかにした。
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
McFall-Ngai, M., Hadfield, M. G., Bosch, T. C. G., Carey, H. V., Domazet-Lošo, T., Douglas, A. E., et al. 細菌の世界における動物、生命科学の新たな命題。Proc. Natl. Acad. 米国）110, 3229-3236.
パブメッドアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Miao, Y.-H., Xiao, J.-H., and Huang, D.-W. (2020). バクテリオファージWOの分布と進化、およびウォルバキアとの拮抗関係。Front. Microbiol. 11:595629.
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Santo Domingo, J. W., Kaufman, M. G., Klug, M. J., Holben, W. E., Harris, D., and Tiedje, J. M. (1998). 後腸内細菌群集の構造と機能に及ぼす食餌の影響。Mol. Ecol. 7, 761-767. doi: 10.1046/j.1365-294x.1998.00390.x.
全文｜Google Scholar
Savary, S., Horgan, F., Willocquet, L., and Heong, K. L. (2012). イネにおける持続的病害虫管理の原則のレビュー。Crop Prot. 32, 54-63. doi: 10.1016/j.cropro.2011.10.012.
Google Scholar
Sun, Z., Huang, S., Zhu, P., Tzehau, L., Zhao, H., Lv, J., et al. 2bRAD-Mを用いた低バイオマスまたは分解されたマイクロバイオームの種分解シーケンス。ゲノム生物学 23:36.
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Suzuki, T. A., Phifer-Rixey, M., Mack, K. L., Sheehan, M. J., Lin, D., Bi, K., et al. 野生マウスの腸内細菌叢の宿主遺伝的決定因子。Mol. Ecol. 28, 3197-3207. doi: 10.1111/mec.15139.
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Taylor, M. J., Bandi, C., and Hoerauf, A. (2005). Wolbachia bacteria endosymbionts of filarial nem-atodes. Adv. Parasitol. 60, 245-284. doi: 10.1016/S0065-308X(05)60004-8
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Wang,Y.B.、Li,C.、Yan,J.Y.、Wang,T.Y.、Yao,Y.L.、Ren,F.R.、他（2022年）。オートファジーはコナジラミと共生生物の代謝的相互作用を制御する。Appl. Environ. Microbiol. 88:e0208921. doi: 10.1128/AEM.02089-21.
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Wang, S., Meyer, E., McKay, J., and Matz, M. V. (2012). 2b-RAD：ゲノムワイドなジェノタイピングのためのシンプルで柔軟な手法。Nat. 方法 9, 808-810.
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Wang, Z., Yang, H., Zhou, C., Yang, W. G., Jin, D.-C., and Long, G.-Y. (2019). Molecular cloning, expr-ession, and functional analysis of the chitin synthase 1 gene and its two alternative splici-ng variants in the white-backed planthopper, Sogatella furcifera (Hemiptera: Delphacidae). (1)遺伝子発現,(2)遺伝子発現,(3)遺伝子発現,(4)遺伝子発現,(5)遺伝子発現,(6)遺伝子発現.
パブコメ抄録｜全文｜Google Scholar
Wang, Z., Zhou, C., Long, G. Y., Yang, H., and Jin, D. C. (2018). Buprofezin の亜致死効果は、シロオビヒメヨコバイ Sogatella furcifera (Hemiptera: Delphacidae) の発育、生殖およびキチン合成酵素 1 遺伝子 (SfCHS1) 発現に及ぼす。J. Asia Pac. Entomol. 21, 585-591. doi: 10.1016/j.aspen.2018.03.009
Google Scholar
Wasala, S. K., Brown, A. M. V., Kang, J., Howe, D. N. K., Peetz, A. B., Zasada, I. A., et al. Wolbachia and Cardinium endosymbionts in plantp-arasitic nematode field populations. Front. Microbiol. 10:964. doi: 10.3389/fmicb.2019.00964
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Werren, J. H. (1997). ウォルバキアの生物学。Annu. (1997).ウォルバキアの生物学. 42, 587-609. doi: 10.1146/annurev.ento.42.1.587.
Google Scholar
Werren, J. H., Baldo, L., and Clark, M. E. (2008). Wolbachia: Master manipulators of Invertebrate bio-logy. Nat. Rev. Microbiol. 6, 741-751. doi: 10.1038/nrmicro1969.
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Yang,K.、Qin,P.-H.、Yuan,M.-Y.、Chen,L.、Zhang,Y.-J.、Chu,D. (2022). Cardiniumの感染密度パターンは、暑熱条件下における侵入性コナジラミの細菌群集の応答に影響を与える。Insect Sci. 30, 1149-1164.
Google Scholar
Yang, K., Xie, K., Zhu, Y. X., Huo, S. M., Hoffmann, A. A., and Hong, X. Y. (2019). ハダニTetranychus truncatusのスピロプラズマはウォルバキアが優勢である。Insect Mol. 29, 19-37. doi: 10.1111/imb.12607.
抄録｜全文｜Google Scholar
Ye, Y. H., Seleznev, A., Flores, H. A., Woolfit, M., and McGraw, E. A. (2017). Droso-phila melanogasterの腸内細菌叢はウォルバキアと相互作用するが、ウォルバキアが介在する抗ウイルス防御には寄与しない。J. Invertebr. Pathol. 143, 18-25. doi: 10.1016/j.jip.2016.11.011
Google Scholar
Zeng, Z., Fu, Y., Guo, D. Y., Wu, Y. X., Ajayi, O. E., and Wu, Q. F. (2018). 細菌内共生生物Cardi-nium cSfurのゲノム配列は、Sogatella furcifera宿主における共生関係を理解するための洞察を提供する。(1)ゲノム配列の解析(2)ゲノム配列の解析(3)ゲノム配列の解析(4)ゲノム配列の解析(5)ゲノム配列の解析(6)
PubMedアブストラクト｜全文｜Google Scholar
Zhang, Y. K., Chen, Y. T., Yang, K., and Hong, X. Y. (2016). A review of prevalence and phylogeny of the bacterial symbiont Cardinium in mites (subclass: Acari). Syst. Appl. Acarol. 21, 978-990.
Google Scholar
Zhang, X., Li, T. P., Zhou, C. Y., Zhao, D. S., Zhu, Y. X., Bing, X. L., et al. 褐色小型プランクトンLaodelphax striatellusにおいて、抗生物質暴露が細菌群集を変化させた。昆虫科学, 27, 895-907.
抄録｜全文｜Google Scholar
Zhao, D. X., Hoffmann, A. A., Zhang, Z. C., Niu, H. T., and Guo, H. F. (2018). Bemisia tabaci (Hemiptera: Aleyrodoidea)における相利共生生物HamiltonellaとCardiniumの相互作用：協力か対立か？J. Econ. Entomol. 111, 2660-2666.
全文｜Google Scholar
Zhou, G. H., Wen, J. J., Cai, D. J., Xu, D. L., and Zhang, S. G. (2008). 南方稲黒縞萎縮ウイルス：レオウイルス科の新種フィジウイルス提案。Chin. Sci. Bull. doi: 10.1007/s11434-008-0467-2.
Google Scholar
Zhou, C., Yang, H., Wang, Z., Long, G.-Y., and Jin, D.-C. (2018). Sogatella furcifera (Horváth)を異なる殺虫剤に曝露した場合の比較トランスクリプトーム解析。Sci. Rep. 8:8773. doi: 10.1038/s41598-018-27062-4.
パブコメ抄録｜全文｜Google Scholar
真菌類は、その菌糸の伸長によって、菌糸の伸長を阻害することが知られている。(2022)野生のカブトムシにおける真菌c群集形成のメカニズムは、宿主の特性と局所環境によって調節される。NPJ Biofilms Microb. 8:31. doi: 10.1038/s41522-022-00298-9
パブコメ抄録｜全文｜Google Scholar
Zhu, Y. X., Song, Y. L., Zhang, Y. K., Hoffmann, A. A., Zhou, J. C., Sun, J. T., et al. 地域環境と宿主植物に関連したハダニ類における通性細菌内共生体の発生率。Appl. Environ. Microbiol. 84, e02546-e02517. doi: 10.1128/AEM.02546-17.
PubMedアブストラクト｜フルテキスト｜Google Scholar
Zug, R., and Hammerstein, P. (2015). 悪者がいい人に？節足動物宿主におけるウォルバキアの相互作用に関する批判的評価。Biol. 生物学, 90, 89-111.
パブコメ抄録｜全文｜Google Scholar
キーワード Sogatella furcifera、Wolbachia、Cardinium、2bRAD-Mシーケンス、環境要因
引用 害虫Sogatella furciferaの微生物相を形成する共生生物と環境因子の両方が寄与している。Front. Microbiol. 14:1336345.
受理された： 2023年11月10日；受理：2023年12月26日；
発行：2024年1月24日
編集者
Zhenlin Han, ハワイ大学マノア校, アメリカ合衆国
査読者
Vipin Rana, メリーランド大学カレッジパーク校, アメリカ合衆国
Haijian Huang, 寧波大学, 中国
Copyright © 2024 Yang, Zhang, Wang, Jin and Chu. これはクリエイティブ・コモンズ表示ライセンス（CC BY）の条件の下で配布されるオープンアクセス記事です。原著者および著作権者のクレジットを明記し、学術的に認められている慣行に従って本誌の原著を引用することを条件に、他のフォーラムでの使用、配布、複製を許可する。これらの条件に従わない使用、配布、複製は許可されない。
*通信：Dong Chu, ドン・チュー、chinachudong@qau.edu.cn
免責事項：本論文で表明されたすべての主張は、あくまで著者個人のものであり、必ずしも所属団体や出版社、編集者、査読者の主張を代表するものではない。本記事で評価される可能性のあるいかなる製品、またはその製造元が主張する可能性のあるいかなる主張も、出版社によって保証または支持されるものではない。
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