微生物が介在するγδ17細胞の制御のためのバイナリーモジュール、微生物が介在するプログラム細胞死タンパク質1の発現によって特徴づけられる

報告|第42巻、第8号、112951、2023年8月29日
微生物が介在するγδ17細胞の制御のためのバイナリーモジュール、微生物が介在するプログラム細胞死タンパク質1の発現によって特徴づけられる

https://www.cell.com/cell-reports/fulltext/S2211-1247(23)00962-2?rss=yes&utm_source=dlvr.it&utm_medium=twitter

黄 興一
ユエ・シュエ
マーク・L・ジュエル
篠原真理
ニーラジ・K・スラナ
ジャンナ・エレナ・ハマー 8
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脚注を表示オープンアクセス掲載:2023年08月08日DOI:https://doi.org/10.1016/j.celrep.2023.112951

ハイライト

粘膜バリア常在γδ17細胞はPD-1高発現細胞である。

微生物叢はPD-1とIL-17のγδ17発現を誘導し維持する

PD-1のγδ17細胞に対する抑制作用により、in situでのIL-17産生が制限される。

腸の炎症はγδ17 TCRシグナル、PD-1、IL-17、脂質の取り込みを増強する。
まとめ
微生物叢がどのように自然免疫様γδT細胞を制御しているのか、あるいは微生物叢が慢性的な刺激を与える粘膜バリア内で、微生物叢がどのようにエフェクター機能を制限しているのかについては、ほとんど知られていない。ここで我々は、微生物叢が介在するγδ17細胞の制御は、その場でインターロイキン-17（IL-17）産生を指示し、同時に抑制性受容体であるプログラム細胞死タンパク質1（PD-1）の発現を指示するという、二律背反的なものであることを示した。微生物叢主導性のPD-1とIL-17の発現とPD-1高発現の優先的な採用は、複数の粘膜バリアーにわたるγδ17細胞で保存されている。重要なことは、微生物叢主導性のPD-1は、粘膜に常在するγδ17エフェクターによるその場でのIL-17産生を抑制することであり、微生物叢とγδ17細胞の活性化と抑制を同時に結びつけている。さらに、この微生物叢主導型モジュールの動的な性質を示し、PD-1、IL-17、および脂質の取り込みの増強によって示されるγδ17細胞の炎症関連活性化状態を定義することで、微生物叢が密集した組織環境におけるγδ17エフェクターの機能をサポートするために、微生物叢を動的なサブセット特異的活性化と代謝リモデリングに関連付ける。

図解抄録
図サムネイルfx1
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キーワード
γδ
T細胞
微生物叢
PD-1
炎症
腸
IL-17
粘膜バリア
肺
女性性器
研究テーマ
CP: 免疫学
CP: 微生物学
はじめに
インターフェロンγ（IFN-γ）産生（γδIFN-γ）またはインターロイキン-17（IL-17）産生（γδ17）γδT細胞の専用サブセットは胸腺で確立され1,2,3,4,5,6,7、さらに組織特異的な合図によって末梢で形成される8,9,10,11,12,13,14,15,16,17。このような手がかりの中でも、腸内細菌叢は、γδT細胞を活性化したり、病原体や組織傷害に対する応答を形成したりする可能性のある多様なシグナルを提供することから、特に優れていると考えられる8,9,17,18,19,20,21,22,23,24。
腸では、微生物叢の影響は腸上皮層（IEL-γδ）のγδT細胞について最もよく説明されており、微生物叢は抗菌薬の発現8、活性化マーカーCD69の発現25、および腸の損傷に対するIEL-γδの応答を誘導する26。微生物叢が腸の固有層（LP）に存在するγδT細胞に同様の応答を誘導するのか、あるいは両方のγδT細胞サブセットに同様に作用するのかは不明である。微生物叢がLPに常在するγδT細胞に影響を与えることを示唆する証拠がある一方で、この制御の性質に関しては相反するデータがある。ある報告では、微生物叢がLPに常在するIL-1R+ γδ17細胞を増殖させ、IL-17産生を亢進させるが、この反応はマウス系統特異的である22。全体として、微生物叢に由来するγδT細胞の制御ネットワークは十分に解明されておらず、特にサブセット特異的に作用するものを同定することは喫緊の課題である。なぜなら、γδIFN-γサブセットとγδ17サブセットは、腸の健康、疾患、腸内感染に対する防御において、それぞれ異なる役割を果たすと考えられているからである19,29,30,31。
ここで我々は、微生物叢がIL-17と抑制性受容体プログラム細胞死タンパク質1（PD-1）の発現を促進する、γδ17細胞のサブセット特異的な微生物叢依存性制御モジュールを同定した。微生物叢主導性のPD-1は、内因性のγδ17エフェクターによる自然なIL-17産生に拮抗するが、PD-1高発現の表現型はγδ17エフェクター機能のアップレギュレーションを妨げるものではなく、γδ17エフェクター機能は腸の炎症に応答して有意に増強される。炎症に伴うγδ17細胞の活性化は、脂質の取り込みの増大と同時に起こることから、代謝と微生物叢主導の応答は動的に制御されており、腸内常在γδT細胞のサブセット特異的であることが示された。
研究結果
大腸常在γδ17細胞はPD-1高発現型により区別される
微生物叢に由来するサブセット特異的制御モジュールを同定するために、これらがIELまたはLP集団の基礎活性化状態に異なる影響を及ぼすと考えた。最初に活性化マーカーCD69とCD44をテストしたが、IEL-とLP-γδT細胞の間で発現がほぼ重複していることがわかった（図S1）。次に、活性化されたαβT細胞では発現がよく報告されているPD-1をテストした32,33,34が、γδT細胞で発現するPD-1のドライバーは不明である。興味深いことに、IEL-およびLP-γδT細胞によるPD-1の発現は著しく異なっており、PD-1はLPコンパートメントにのみ発現し、IL-17産生エフェクターにのみ発現した（図1A-1EおよびS1）。
図1PD-1発現
図1大腸常在γδT細胞におけるPD-1発現はγδ17サブセットに特異的である
キャプション
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IL-17を産生するエフェクターの80％以上がPD-1+であったという結果から、PD-1のアップレギュレーションがγδ17サブセットの優勢な反応である可能性を検討した（図1E）。これを検証するため、標準的なマーカーを用いてγδIFN-γ（CD44low/midCD27+CCR6-）とγδ17サブセット（CD44highCD27-CCR6+）1,2を区別しようと試みたが、大腸LPにCCR6+またはCD27+のγδT細胞は見られなかった（図S1）。LPに常在するγδT細胞がこれらの系統識別分子を発現しないことは、以前から示唆されていた2,25。これらの不明な点はともかく、従来のマーカーは失敗したが、PD-1の発現は強固であったので（図S1）、PD-1とCD44を併用する戦略を実施したところ、大腸LP γδ T細胞が3つの集団に分離されることがわかった： PD-1+CD44high集団、PD-1-CD44mid集団、PD-1-CD44highのマイナー集団である（それぞれI、II、III集団で、雌雄マウスで同様の結果であった；図1F、1G、S1）。
PD-1+CD44high集団はγδ17細胞であり、これらはRORγtを発現し、30％～70％が刺激によりIL-17を産生した（図1H、1I、S1）。IFNγを産生したものはなかった（図1J）。対照的に、PD-1-CD44mid集団ではIFNγ（IL-17ではない）が観察され、その全てがRORγtであった（図1H-1JおよびS1）。遺伝子発現解析から、Il17aとIl17fはPD-1+CD44high集団にのみ存在し、IfngはPD-1-CD44mid集団に濃厚であることが確認された（図S1）。マイナーなPD-1-CD44high集団は、RORγt+細胞とRORγt-細胞、および両方のタイプのエフェクターが混在していた（図1H-1JおよびS1）。
実際、天然のIL-17産生はPD-1+CD44high集団に最も多く、これらは内因性γδ17エフェクター集団の中で圧倒的に優勢であり、その数はPD-1陰性集団の20倍から100倍であった（図1K-1M）。
これらの特徴から、結腸LP中のγδ17細胞の大部分は、PD-1+CD44highの表現型によって容易に区別される。対照的に、γδIFN-γ T細胞の大部分はPD-1-CD44mid表現型によって区別される。IFN-γを産生するエフェクターとIL-17を産生するエフェクターによるCD44の発現が部分的に重複していることから（図1F、1H-1J、およびS1）、結腸LP内でγδIFN-γ（PD-1-）とγδ17サブセット（PD-1+）を完全に区別するためには、PD-1が必要であることが強調される。さらに、IELの中にRORγtとIL-17が存在しないことから（図1AとS1）、γδ17細胞は結腸の上皮コンパートメントに存在しないことが示された。
大腸LP γδ T細胞におけるサブセット特異的PD-1発現の根拠を調べたところ、PD-1+CD44高発現集団には、様々な組織でγδ17集団の大部分を構成することが知られているVγ4およびVγ6サブセット（Vγ1/2-Vγ4-）が含まれていたため、（Nur77発現35に基づく）T細胞レセプターを介した強直性シグナル伝達による特異性ではなく、厳密には単クローン性応答でもないことが示された14,36,37（図S1）。さらに、他のタイプのIL-17+ T細胞エフェクターと比較して、IL-17産生γδT細胞はPD-1+の頻度が最も高く、PD-1タンパク質を最も多く発現していたため、γδ17細胞への発現はIL-17産生だけの固有の美徳ではなかった（図S1）。
粘膜バリア常在γδ17細胞はPD-1高発現の表現型を優先的に採用する。
興味深いことに、肺と女性性器（FGT）にもPD-1+CD44+高発現γδT細胞の強固な集団が存在し、そのすべてがRORγt+であった（図S2；表S1）。また、肺とFGTのIL-17産生エフェクターは優先的にPD-1highであり（表S1）、PD-1highの表現型はいくつかの異なる粘膜バリア組織のγδ17細胞に共通しているという仮説を支持した。
これらの共通性とは異なり、PD-1がγδ17サブセットに排他的であるかどうかについては、組織特異的な影響が明らかであった。この点で、肺には、CD44、RORγt、IL-17を発現しないため、γδIFN-γサブセットと一致するPD-1+細胞が存在した（図S2）。肺のPD-1発現γδT細胞はすべて、CD45抗体による静脈内標識から除外され、肺組織に存在することが確認された（図S2）。γδIFN-γ細胞が肺でPD-1を発現し、他の粘膜バリアでは発現しないことから、PD-1の発現に組織特異的因子が影響していることが示唆された。この仮説を検証するために、リンパ節（腸間膜と皮膚からの排出）、脾臓、胸腺などのリンパ組織を評価した。粘膜バリアとは対照的に、リンパ節と脾臓にはPD-1+CD44高値集団はほとんど見られず、IL-17産生者のほとんどはPD-1-であった（図S2；表S1）。代わりに、リンパ節と脾臓におけるPD-1の発現は、γδIFN-γサブセットのCD27+細胞に優先的であった（図S2）。胸腺はリンパ組織の中では例外であったが、これは胸腺γδT細胞の90％以上がPD-1+だったからである（図S2；表S1）。γδ17サブセットでは、粘膜バリアでの滞留が優先的にPD-1を発現させた。さらに、大腸のようないくつかの粘膜バリアでは、PD-1の発現はγδ17サブセットにのみ見られた。
γδ17細胞によるPD-1発現には、腸内細菌叢からの持続的刺激が必要である。
以上の結果から、サブセット特異的なPD-1発現を支える組織特異的な手がかりを同定するために、腸に注目した。興味深いことに、近位小腸のほとんどのγδ17細胞はPD-1-/lowであったため、腸での発現はデフォルトではなかった。また、PD-1+CD44high集団の豊富さと、腸の長さに沿ったPD-1の全体的なMFI（平均蛍光強度）から、PD-1は結腸でピークを示す領域特異的因子によって駆動されていることが示唆された（図S2；表S2）。そこで、10週齢のマウスに抗生物質を投与して、大腸微生物叢の必要性を検証した。実際、抗生物質投与はγδT細胞集団の顕著なリモデリングを誘導し、その結果、PD-1+CD44高値γδT細胞は3倍以上減少し、それでもわずかに残ったγδT細胞はPD-1タンパク質を有意に減少させた（オスとメスで；図2A-2DとS2）。抗生物質投与はCD44には影響を及ぼさなかったので、PD-1の減少はこのタンパク質に特異的であった。重要なことは、これらの変化がγδ17細胞の減少によるものではないことである。というのも、RORγt+集団は抗生物質投与マウスでは正常な存在量であり、これらがPD-1を5倍以上減少させていることは明らかだったからである（図2Eと2F）。これらの結果を総合すると、大腸常在γδ17細胞によるPD-1発現は永続的ではなく、微生物叢依存的に持続することが示された。
図サムネイルgr2
図2微生物叢はγδ17細胞上のPD-1を維持し、内因性γδ17エフェクターによる天然のIL-17産生を制限する
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PD-1のアップレギュレーションを支える微生物叢主導のシグナルを調査したところ、IL-1βシグナル、T細胞受容体（TCR）シグナル、あるいは微生物が分節した糸状菌のいずれも反応に大きな影響を及ぼさなかったため、単一の経路が支配的な役割を果たすことはなかった（図S2）。PD-1が大腸のγδ17細胞の大部分で発現していることを示した結果と合わせて考えると、この反応の基盤は高度に保存されており、微生物叢に由来する多様なシグナルによって駆動されている可能性が高いことが示唆される。
微生物叢主導型PD-1は内因性γδ17エフェクターによるIL-17産生を阻害する
抗原提示に依存するαβT細胞では、PD-1の抑制機能がよく特徴付けられていることから34、我々はγδ17細胞におけるPD-1の機能を明らかにすることにした。微生物叢主導型のPD-1が、他の微生物叢主導型の応答を抑制するというのが自然な仮説であろう。しかし、そのような反応の性質は不明であり、過去の報告では相反する結果が得られている。22,27,28 PD-1の抑制機能を検証できるように、これらの矛盾を解決し始めるために、内因性のγδ17エフェクターはPD-1高発現であり、外因性の刺激を与えなくても自然にIL-17を産生するので、微生物叢が必要かどうかを検証した（図1M）。実際、内因性のγδ17エフェクターは抗生物質投与マウスで10倍減少し、残ったエフェクターはGFP（IL-17）が有意に減少したことから、天然のIL-17産生が微生物叢依存的にアップレギュレートされたことが示された（図2G-2J）。天然のIL-17とは異なり、外因性刺激によって産生されたIL-17は変化しなかったことから、微生物叢が組織環境のその場で作用するエフェクター機能に最も大きな影響を及ぼしていることが示された（図2K-2N）。同様に、肺とFGTに常在するγδ17細胞は、微生物叢依存的に天然のIL-17とPD-1を発現し、この発現のバイナリーモジュールは、複数の粘膜バリアーにわたって保存されていることが示された（図S3）。
微生物叢がPD-1と天然型IL-17を誘導することを立証した後、PD-1が内因性γδ17エフェクターに対して阻害的であるかどうかを試験した。抗PD-1を3日間投与したところ、確かにこの短期間のPD-1遮断は内因性GFP（IL-17）＋エフェクターの存在量を増加させ、PD-1＋集団のエフェクターに特異的に作用することがわかった（図2O-2R）。重要なことは、PD-1遮断は全γδT細胞集団をグローバルに破壊したり、GFP(IL-17)+CD4 T細胞の存在量を変化させたりしなかったことである。このことは、この治療が恒常性を広範囲に乱したり、IL-17産生エフェクターに無差別に作用したりしなかったことを示している（図S4）。これらの結果を総合すると、PD-1阻害は結腸常在γδ17エフェクターによるin situ IL-17産生を制限することが示された。PD-1とIL-17は微生物叢依存的にアップレギュレートされたので、これらの分子は一緒になって、前者が後者を抑制する、微生物叢依存的なγδ17細胞の制御モジュールを確立した。
炎症によるγδ17細胞の活性化は、PD-1とIL-17を誇張する。
この病態は微生物叢に影響されるため、PD-1とIL-17のユニークな発現様式が腸の炎症によって誘導されるであろうという仮説を立てた。
γδ17細胞はDSS大腸炎の初期（3日目）に関与すると考えられているが18,30、マウスが著しい体重減少を示すまで（7日目）、明らかな変化は見られず、そこでPD-1+γδ17細胞はPD-1レベルを定常状態のそれよりも平均2倍高めた（図3A、3B、3D）。すでにPD-1レベルの高いこの集団でPD-1が増加するとは予想していなかったが、この結果は、PD-1の増加がγδ17細胞の関与と活性化を示していることを示唆した。この仮説に一致して、PD-1が誇張されたγδ17細胞は、刺激によりIL-17産生が亢進したことから、DSS大腸炎に反応してエフェクター機能とPD-1がアップレギュレートされたことが示唆された（図3Dおよび3F）。これらの変化以外には、IL-17＋の割合やPD-1＋あるいはPD-1-γδT細胞集団の存在量に差は見られなかったことから、腸の炎症がγδT細胞サブセット間の既存の比率をリモデリングしたり、PD-1のサブセット特異的発現を不安定化したりすることはないことが示唆された（図3A-3Cおよび3E）。さらに、PD-1-γδT細胞のIFN-γ産生機能またはIL-17産生機能の存在量または強度には変化がなかったことから（表S3）、DSS大腸炎に応答して増強されたエフェクター機能は、PD-1+γδ17細胞において最も強固であることが示唆された。これらの所見を総合すると、IL-17産生能の亢進とPD-1の誇張は、DSS大腸炎におけるPD-1+γδ17細胞のサブセット特異的な反応であったことが示唆される。
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図3炎症に伴うγδ17細胞の活性化がPD-1とIL-17産生を増大させる
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41,42,43。DSS大腸炎に対する反応と一致して、大腸炎Muc2-/-マウスのγδ17細胞はPD-1を誇張し、IL-17産生を著しく増強した（図S4）。これらの増強がMuc2-/-マウスとDSS大腸炎で共通していたことは、PD-1とγδ17エフェクター機能の動的調節が、腸炎症におけるγδ17細胞の活性化反応であることを示している。
エフェクターモジュールと抑制モジュールの相互のアップレギュレーションは、炎症によって誘発されたPD-1の誇張が、エフェクター機能の増強と同時に起こることを完全に禁止するものではないことを示唆した。この仮説を厳密に検証するために、DSS大腸炎におけるin situ IL-17産生を評価した。内因性γδ17エフェクターの存在量は変化しなかったが、これらのエフェクターは有意に多くのIL-17を産生し、GFP(IL-17)のMFIは2倍増加した（図3G-3I）。重要なことは、これらの機能的に増強されたエフェクターはPD-1も誇張していたことである。GFP(IL-17)+エフェクターがすでにPD-1+γδ17集団よりもPD-1を多く発現していたことを考えると、これは興味深いことであった（図3J）。このように、炎症に伴うPD-1の誇張は、IL-17産生エフェクター機能の同時アップレギュレーションを妨げるものではなかった。
重要なことに、抗生物質投与マウスと無菌マウスの両方から得られた結果から、黄砂-大腸炎におけるPD-1の増大は微生物叢依存的であることが示され、この微生物叢主導型モジュールが定常状態と炎症の両方に保存されていることが示唆された（図S4）。これらの結果を総合すると、微生物叢に依存したPD-1の増大とIL-17産生の亢進は、大腸常在γδ17細胞の炎症誘発性活性化状態の特徴であることが示唆される。
脂質代謝亢進は腸炎症におけるγδ17細胞のサブセット特異的反応である
次に、炎症に伴う活性化を支える細胞内在性の変化を明らかにすることにした。まずDSS大腸炎におけるTCRシグナル伝達を評価したところ、Nur77(GFP)を発現しているγδ17細胞の割合とNur77(GFP)のMFIが上昇したことから、炎症に伴う活性化がTCRシグナル伝達の上昇と関連していることが示唆された（図4A-4C）。興味深いことに、γδIFN-γ細胞のNur77(GFP)は変化しなかったことから、DSS-colitisはγδT細胞のTCRシグナル伝達をサブセット特異的に増強することが示唆された（図4D-4F）。
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図4炎症関連活性化に伴うγδ17細胞の動的代謝再配線は、大腸LPにおける脂質の取り込みを促進する。
キャプション
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次に、TCRシグナルの増強と炎症に伴う活性化が代謝の再配線と関連しているかどうかを検証した。γδ17細胞とγδIFN-γ細胞のミトコンドリア含有量と活性を、それぞれMitoTrackerとテトラメチルローダミン（TMRE）を用いて評価した。定常状態でのサブセット特異的な区別は顕著で、γδ17集団では、これらの分析物に対して陽性に染色される細胞の割合が2～4倍高かった（図4G、4H、4J、4K）。これらの結果は、非腸管組織や腫瘍におけるミトコンドリア関連代謝のサブセット特異的区別を概説した報告14,16,44,45と一致しており、γδ17細胞が、もともとPD-1高発現組織である結腸において、優れたミトコンドリア含量／活性を有するという結論を支持するものである。抗生物質投与マウスでの結果は、ミトコンドリア含量／活性が微生物叢に依存しないことを示唆したが、後者ではPD-1がダウンレギュレーションしているため、抗生物質投与マウスではγδIFN-γサブセットとγδ17サブセットを明確に区別することができず、これらの解析は難解であった（図S4）。ミトコンドリア関連代謝におけるサブセット特異的な差は、DSS大腸炎の間、持続的かつ静的であり、試験したどのパラメーターにも変化はなかった（図4H、4I、4K、および4L）。これらのデータを総合すると、結腸常在γδ17細胞はミトコンドリア含有量／活性が非常に豊富であるが、DSS大腸炎における細胞の活性化は、このあらかじめ確立された代謝形質を不安定化も増強もしなかったことが示唆される。
最後に、リンパ系組織から単離されたγδ17細胞の優先的機能であることが示されている脂質取り込みの代謝能を解析した14,16。脂質取り込みはどちらのサブセットでも頑健で、同程度の割合の細胞が標識パルミチン酸（BODIPY-FL-C16）を取り込む高い能力を示した（図4Mおよび4N）。取り込みはサブセット特異的ではなかったが、BODIPY-FL-C16のMFIはγδ17細胞で高く、この特性は抗生物質投与マウスでも持続したが、この環境では上述のようにγδT細胞サブセットのゲーティングが不明瞭であった（図S4）。興味深いことに、ミトコンドリア関連代謝の静的な性質とは対照的に、γδ17細胞による脂質の取り込みはDSS大腸炎中に亢進しており、炎症に伴う大腸のγδ17細胞の活性化が脂質代謝の亢進と同時に起こっていることが示唆された。この代謝反応はγδIFN-γサブセットでは起こらなかったことから、DSS大腸炎における脂質の取り込み亢進はγδ17細胞の急性のサブセット特異的反応であるという結論が支持された（図4O）。脂質の取り込みとTCRシグナル伝達が選択的に亢進したことは、脂質のホメオスタシスの動態の変化が、腸の炎症に応答したIL-17産生の亢進とγδ17細胞の細胞活性化を支持していることを示唆している。
考察
γδT細胞は胸腺で、また環境的な合図によって形成される3,8,9,10,11,12,13,14,15,16,46,47。微生物叢の影響は予期されるものではないが、この制御の性質は、おそらく以前の研究が外因性刺激によって産生されるサイトカインに焦点を当てていたため、γδ17サブセットについて特定することは困難であった27,28。その代わりにin situでのIL-17産生に注目することで、IL-17のエフェクター機能と抑制モジュールであるPD-1が微生物叢依存的に相互にアップレギュレートされる、微生物叢を介した制御のバイナリーモジュールを同定した。微生物叢によって誘導されるPD-1とIL-17の相互作用、これらのモジュールをアップレギュレートする微生物の動態、そしておそらく微生物叢由来の短鎖脂肪酸(28)が一緒になって、腸や他の粘膜バリアのγδ17細胞を彫刻している。
PD-1発現を支えるメカニズムは、αβT細胞に注目されてきた。αβT細胞は、ある環境では「疲弊」し、PD-1高発現の表現型はその機能障害と関連している。濾胞性Tヘルパー細胞に発現するPD-1もまた永続的であり、生殖中枢におけるその機能にとって重要である34,50,51。このように、粘膜γδ17細胞のPD-1高発現型が永続的でないことは、PD-1+αβT細胞とは対照的であり、PD-1をコードする遺伝子座の改変を制御する制御メカニズムが異なることを示唆している。粘膜バリアと同様に、皮膚にもPD-1+ γδ17細胞が存在し、11 PD-1遮断時の様々な組織転帰やPD-1欠損に伴う自己免疫に、これらの細胞やPD-1を誘導する微生物叢が関与していることが示唆される34,52。実際、この原稿の改訂中に、マウス腫瘍浸潤の中にPD-1+ γδ17細胞を発見したという2つの報告があり、γδ17細胞が抗PD-1免疫療法によって調節される可能性が浮上した53,54。また、ヒトでは、PD-1+でIFNγを産生するγδT細胞が乳房組織と末梢血で同定された55,56,57,58。どちらのγδTサブセットに対するPD-1の作用機序も、これらの細胞が微生物叢に由来するものを含む生理的な手がかりを受け取る環境で評価されれば、明らかになるはずである。
今回の研究結果は、腸の炎症に対するTCRシグナル伝達、IL-17、PD-1、および脂質代謝の動的な性質を示している。これらの増強はγδ17細胞に特異的であり、炎症に伴うこれらのエフェクターの活性化の特徴を定義している。これらの鋭敏なリモデリング現象は、γδ17細胞の生得的な能力の基本であると考えられ、組織や病態を超えて保存されているのであれば、これらの知見は、TCRやPD-1様式を介してγδシグナル伝達を調節する治療法への扉を開くものである。実際、組換えPD-L1は、大腸炎のマウスモデルにおいて転帰を改善する59。このことは、γδ17細胞上の抑制性PD-1モジュールが、腸炎症時の治療標的であることを示唆している。生物学的に利用可能な脂質や脂質代謝の調節を中心とした他の治療法も、魅力的な新しい可能性である。
研究の限界
γδ17細胞におけるPD-1シグナルの機能的役割に対処するために短期間の抗PD-1を使用したが、この集団への影響は間接的であった可能性が残る。定常状態、大腸炎、その他の環境におけるγδ17細胞上のPD-1発現の生理学的役割については、影響と意義についてさらなる機能的評価が必要である。これらの疑問に対する明確な答えは、γδ17細胞上のPD-1を細胞特異的に欠失させることが必要であろう。技術的な限界として、Vγ鎖の全レパートリーを検査できる市販の抗体がないため、PD-1+γδ17細胞のVγ組成を正式に知ることができないという点がある。もう一つの技術的限界は、抗生物質で治療したマウスでは、PD-1のダウンレギュレーションが、結腸LPのγδT細胞集団を区別するために使用したゲーティング戦略を鈍らせることである。
STAR★方法
主要リソース表
試薬またはリソースのソース IDENTIFIER
抗体
Brilliant Violet 785™ 抗マウスCD45 (30-F11) Biolegend Cat#103149; RRID:AB_2564590
ビオチン抗マウス CD3ε (145-2C11) Biolegend Cat#100304; RRID:AB_312669
FITC 抗マウス TCRβ (H57-597) Biolegend Cat#109206; RRID:AB_313429
PE/Cyanine7 抗マウス TCRβ (H57-597) Biolegend Cat#109222; RRID:AB_893625
APC/Fire™ 750 抗マウス TCRγ/δ（GL3）バイオレジェンド Cat#118136; RRID:AB_2650828
PE 抗マウス TCRγ/δ（GL3）バイオレジェンド Cat#118108; RRID:AB_313832
Brilliant Violet 510™ 抗マウス CD4 (GK1.5) Biolegend Cat#100449; RRID:AB_2564587
Brilliant Violet 711™ 抗マウス CD8α (53-6.7) Biolegend Cat#100747; RRID:AB_11219594
PerCP/Cyanine5.5 抗マウス CD44 (IM7) Biolegend Cat#103032; RRID:AB_2076204
APC 抗マウス PD-1 (29F.1A12) Biolegend Cat#135210; RRID:AB_2159183
Brilliant Violet 421™ 抗マウス PD-1 (29F.1A12) Biolegend Cat#135221; RRID:AB_2562568
PE 抗マウス CD69 (H1.2F3) Biolegend Cat#104507; RRID:AB_313110
PE 抗マウス CD27 (LG.3A10) Biolegend Cat#124209; RRID:AB_1236464
APC 抗マウス CCR6 (29-2L17) Biolegend Cat#129813; RRID:AB_1877148
PE 抗マウス Vγ1/2 (4B2.9) Biolegend Cat#142703; RRID:AB_10960739
APC 抗マウス Vγ4（UC3-10A6） Biolegend Cat#137707; RRID:AB_10899574
PE/Cyanine7 抗マウス IFNγ (XMG1.2) Biolegend Cat#505826; RRID:AB_2295770
PE 抗マウス IL-17A（TC11-18H10.1） Biolegend Cat#506904; RRID:AB_315464
TruStain FcX™ PLUS (抗マウス CD16/32) (S17011E) Biolegend Cat#156604; RRID:AB_2783138
FITC CD45 (30-F11), eBioscience Invitrogen Cat#11-0451-81; RRID:AB_465049
PE 抗マウス RORγt（B2D）、eBioscience Invitrogen Cat#12-6981-82; RRID:AB_10807092
PE 抗マウス Nur77 (12.14)、eBioscience Invitrogen Cat#12-5965-80; RRID:AB_1257210
InVivoMAb™ 抗マウス PD-1 (RMP1-14) Bio X cell Cat#BE0146; RRID:AB_10949053
InVivoMAb™ ラット IgG2a アイソタイプコントロール (2A3) Bio X cell Cat#BE0089; RRID:AB_1107769
InVivoMAb™ 抗マウス/ラット IL-1β (B122) Bio X cell Cat#BE0246; RRID:AB_2687727
InVivoMAb™ ポリクローナル アルメニアハムスター IgG Bio X cell Cat#BE0091; RRID:AB_1107773
化学物質、ペプチド、組み換えタンパク質
LIBERASE™ リサーチグレード Sigma Aldrich Cat#5401127001
DNase I recombinant, RNase-free solution シグマ・アルドリッチ Cat#04716728001
アンピシリン Duke University Hospital pharmacy N/A
ネオマイシン Duke University Hospital pharmacy N/A
ネオマイシン Duke University Hospital pharmacy N/A
メトロニダゾール デューク大学病院 薬局 N/A
フルコナゾール Duke University Hospital pharmacy N/A
デキストラン硫酸ナトリウム塩（DSS）, Mw ∼ 40000 Chem-Impex Cat#01288
IC 固定バッファー Invitrogen Cat#00-8222-49
eBioscience™ Fixation/Permeabilization concentrate インビトロジェン Cat#00-5123-43
eBioscience™ 固定／透過安定化希釈液 Invitrogen Cat#00-5223-56
透過安定化バッファー 10× Invitrogen Cat#00-8333-56
TRIzol 試薬 Invitrogen Cat#15596026
ホルボール 12-ミリスチン酸 13-酢酸（PMA）Sigma Aldrich Cat#P8139
Streptomyces conglobatus 由来のイオノマイシンカルシウム塩 Sigma Aldrich Cat#I0634
BD ゴルジプラグ™ タンパク質輸送阻害剤 BD Biosciences Cat#555029
eBioscience™ RBC Lysis buffer (multi-species) 10× Invitrogen Cat#00-4300-54
LIVE/DEAD™ 固定可能青色死細胞染色キット Invitrogen Cat#L34962
LIVE/DEAD™ 固定可能緑色死細胞染色キット Invitrogen Cat#L23101
MitoTracker™ グリーン FM Invitrogen Cat#M7514
テトラメチルローダミン、エチルエステル、過塩素酸塩（TMRE） Invitrogen Cat#T669
BODIPY™ FL C16 (4,4-ジフルオロ-5,7-ジメチル-4-ボラ-3a,4a-ジアザ-s-インダセン-3-ヘキサデカン酸) Invitrogen Cat#D3821
重要な市販アッセイ
TaqMan プローブ： Il17a サーモフィッシャーサイエンティフィック Mm00439118_m1
TaqMan プローブ： Il17f サーモフィッシャーサイエンティフィック Mm0052143_m1
TaqMan プローブ Ifng サーモフィッシャーサイエンティフィック Mm01168134_m1
TaqMan プローブ Hprt サーモフィッシャーサイエンティフィック Mm03024075_m1
QuantiTect 逆転写キット Qiagen Cat#205313
TaqMan™ 遺伝子発現マスターミックス appliedbiosystems Cat#4369016
実験モデル 生物／系統
マウス Il17a-GFP マウス (C57BL/6-Il17atm1Bcgen/J) Jackson Laboratory Strain#018472; RRID:IMSR_JAX:018472
マウス Nur77-GFP マウス (C57BL/6-Tg(Nr4a1-EGFP/cre)820Khog/J) Jackson Laboratory Strain#016617; RRID:IMSR_JAX:016617
マウス C57BL/6J ジャクソン研究所系統#000664; RRID:IMSR_JAX:000664
マウス Muc2-/- マウス Velcich et al.41 N/A
無菌マウス Duke University Gnotobiotic Core N/A
ソフトウェアとアルゴリズム
FlowJo™ v10 BD Biosciences https://www.flowjo.com/solutions/flowjo/downloads
GraphPad Prism v9 GraphPad https://www.graphpad.com/
その他
BD LSRFortessa X20 セルアナライザー BD Biosciences N/A
BD LSRFortessa セルアナライザー BD Biosciences N/A
GentleMACS™ Dissociator Miltenyi Biotec Inc. 該当なし
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リソースの有無
連絡先
リソースおよび試薬に関する詳細情報およびリクエストは、リードコンタクトであるGianna Hammer (gianna.hammer@path.utah.edu)までご連絡ください。
材料の入手可能性
本研究では新規のユニークな試薬は作成していない。
実験モデルおよび被験者の詳細
マウス
すべての実験にオスとメスのマウスを使用した。IL17a-GFPマウス（C57BL/6-IL17atm1Bcgen/J、ストック#018472）およびNur77-GFPマウス（C57BL/6-Tg(Nr4a1-EGFP/cre)820Khog/J、ストック#016617）は、The Jackson Laboratoryから購入した。C57BL/6バックグラウンド43に交配したMuc2-/-マウス41をデューク大学に輸入し、さらにジャクソン研究所から購入した社内のC57BL/6Jブリーダーに交配した。大腸菌Muc2-/-マウスは19-20週齢で分析された。他のすべてのマウスは、特別な記載がない限り、8週齢から12週齢の間に解析された。無菌マウスはデューク大学で飼育された。他のすべてのマウスは、Duke UniversityまたはUniversity of Utahのハウジングで、特定の病原体フリー「ウルトラバリア」条件下（Helicobacter、Norovirus、Pasteurella病原体は除外）で維持された。すべての処置は、デューク大学またはユタ大学のInstitutional Animal Care and Use Committeeの承認を得て行われた。
方法の詳細
組織からの細胞分離
腸内常在細胞については、管腔内容物を除去し、組織を2mmに切り、腸組織片をHBSS/10mM HEPES/5mM EDTA/0.625% BSA/1mM DTTで37℃で10分間2回洗浄した。その後、組織をHBSS/10mM HEPES/0.625%BSA で37℃、10分間洗浄し、続いてC-tubes（Miltenyi）中でLiberase（57.6μg/mL）とDNase I（8U/mL）を含む消化カクテルを用いてインキュベートした。近位および遠位小腸サンプルは、それぞれ長さ約10cmで、小腸臓器の最初の1/4（胃に隣接）または最後の1/4（盲腸に隣接）と定義した。
子宮常在細胞の分離のために、子宮のミンチをリベラーゼ（57.6μg/mL）およびDNase I（8U/mL）中、Cチューブ中で37℃、1時間インキュベートし、GentleMACS（Miltenyi）で解離させ、さらに37℃で20分間インキュベートした。サンプルは、細胞分離の前にGentleMACS（Miltenyi）で最終処理した。肺常在細胞については、肺をHBSS/10mM HEPES/5%FBS中のリベラーゼ（60μg/mL）とDNase I（6500 U/mL）を含む溶液で膨張させ、その後37℃で45分間インキュベートし、15分ごとに激しくボルテックスした61。消化後、すべての細胞懸濁液を濾過し、分析前に赤血球溶解を行った。
フローサイトメトリーと細胞選別
単離したばかりの細胞を、FcRブロック（Biolegend）およびLive/dead fixable dead cell staining（Thermo Fisher）で染色した後、以下の抗体でT細胞集団、表面マーカー、サイトカイン発現をゲートした：抗CD45（30-F11）、抗CD3ε（145-2C11）、抗TCRβ（H57-597）、抗TCRδ（GL3）、抗CD4（GK1. 5）、抗CD8α（53-6.7）、抗CD44（IM7）、抗PD-1（29F.1 A12）、抗CD69（H1.2F3）、抗CD27（LG.3A10）、抗CCR6（29-2L17）、抗Vγ1/2（4B2.9）、抗Vγ4（UC3-10A6）、抗IFNγ（XMG1.2）、抗IL-17A（TC11-18H10.1）、抗Nur77（12.14）、および抗RORγt（B2D）。解析されたすべての集団は、以下のマーカーに従って生細胞からゲーティングされた。γδT細胞、（CD45+CD3+TCRδ+TCRβ-、PD-1+CD44high、PD-1-CD44high、PD-1-CD44mid集団を区別するためにPD-1とCD44が続く； 実験によっては、CD27、CCR6、Vγ1/2、またはVγ4も用いた）；CD4 T細胞、（CD45+CD3+TCRβ+TCRδ-CD4+）；CD8 T細胞、（CD45+CD3+TCRβ+TCRδ-CD8α+）。サイトカインの細胞内染色には、BDゴルジプラグ（BD Biosciences）を添加した完全RPMI培地中で、PMA（50 ng/mL）とイオノマイシン（2000 ng/mL）で5時間刺激した。刺激細胞はeBioscience IC固定バッファー（Invitrogen）で固定し、RORγtおよびNur77染色にはeBioscience Foxp3/転写因子固定/透過濃縮液および希釈液（Invitrogen）を用いて細胞を固定し、細胞内抗体染色を行った。フローサイトメトリー解析はBD Fortessa X20（BD Biosciences）を用いて行い、データはFlowJoソフトウェアを用いてさらに解析した。FACSソーティングのために、細胞は上記のようにゲーティングされ、MoFlo Astrios Sorter（Beckman Coulter）でソーティングされた。
定量的PCR
各実験について、結腸固有層細胞を5匹のマウスからプールし、γδT細胞サブセットをTriZol（Thermo Fisher）にソーティングした。QuantiTect逆転写キット（Qiagen）を用いてcDNAを作製し、TaqMan Gene Expression Master Mix（AppliedBiosystems）を用いて以下のTaqManプローブで遺伝子発現を解析した：Il17a（Mm00439618_m1）、Il17f（Mm00521423_m1）、Ifng（Mm01168134_m1）、およびHprt（Mm03024075_m1）。データは2ˆdddctアルゴリズムに従って解析した。
In vivo PD-1およびIL-1β遮断
PD-1遮断のために、IL17a-GFPマウスに200mgの抗PD-1抗体（RMP1-14、BioXcell）またはアイソタイプコントロールのRat IgG2a（2A3、BioXcell）を3日間連続で腹腔内注射した。マウスは3回目の抗体注射の24時間後に分析された。IL-1β遮断のために、IL17a-GFPマウスに200mgの抗IL-1β（B122、BioXcell）またはアイソタイプコントロールポリクローナルアルメニアハムスターIgG（BioXcell）を週2回、2週間にわたって腹腔内注射した。最後の抗体注射から24時間後にマウスを分析した。
抗生物質投与とDSS誘発大腸炎
8～10週齢のマウスに、アンピシリン（1 g/L）、バンコマイシン（500 mg/L）、硫酸ネオマイシン（1 g/L）、メトロニダゾール（1 g/L）、フルコナゾール（500 mg/L）を含む広域抗生物質を4週間飲水投与した。DSS投与マウスには、2%(w/v)のデキストラン硫酸ナトリウム（DSS、Chem-Impex）を7日間飲水投与した。DSS投与中止後、マウスには通常の飲料水を与えた。実験期間中、体重を評価した。マウスは病気の初期段階については3日目に、炎症段階については7-10日目に分析された。一部の実験では、DSS投与の4週間前から投与期間中、マウスに抗生物質を投与した。
ミトコンドリア含有量／活性および脂質の取り込み
代謝分析用の試薬はすべてInvitrogen社から購入し、製造元の指示に従って使用した。LP細胞は以下の試薬のいずれかと37℃で30分間インキュベートした： ミトコンドリア電位を評価するために200 nM tetramethylrhodamine ethyl ester（TMRE）、ミトコンドリア量を測定するために200 nM MitoTracker Green（MitoGreen染色はミトコンドリア膜電位に依存しない）、脂質の取り込みを測定するために1 μM Bodipy-FL-C16（パルミチン酸塩）。細胞は直ちにフローサイトメトリーで分析した。
肺のCD45+細胞の血管内染色
血管内免疫細胞と組織内免疫細胞を区別するために、マウスに麻酔をかけ、3μgのFITC抗CD45（30-F11）を眼窩後注射した62。マウスは注射後5分で安楽死させ、その後直ちに肺免疫細胞を調製した。
定量化と統計解析
統計解析は、GraphPad Prism（GraphPad, San Diego, CA）を用いて、2-tailed Student's t-testまたはTukey's post hoc testを伴う一元配置分散分析を適宜行った。データポイントは、図の凡例または表の凡例に示されているように、1匹のマウスまたは複合サンプルを表す。データは平均値±SDで示した。サンプルサイズ、統計検定、p値は図の凡例に示した： ∗p < 0.05、＊＊p < 0.01、＊＊p < 0.001、＊＊p < 0.0001。
データおよびコード

本論文で報告されたすべてのデータは、要求があれば主担当者が共有する。

本論文ではオリジナルのコードは報告しない。

本論文で報告されたデータを再分析するために必要な追加情報は、要求があればリード・コンタクトから入手可能である。
謝辞
著者らは、代謝を調べるための試薬について助言をいただいたDiana Healey博士、皮膚のγδT細胞について助言をいただいたAmanda MacLeod博士とMelodi Whitley博士に感謝したい。図表の一部はBioRenderソフトウェアで作成した。これらの研究は、American Association of Immunologists Careers in Immunology training award（H.-IH.へ）、NIH R01-AI088100（M.L.S.へ）、V Foundation scholar award（G.E.H.へ）、NIH R01-AI145930（G.E.H.へ）の支援を受けた。また、G.E.H.はBurroughs Wellcome Fund Investigator in the Pathogenesis of Infectious Diseaseの支援を受けている。
著者貢献
構想および方法論、H.-IH.およびG.E.H.、調査、H.IH.、Y.X.、M.L.J.、C.Y.T.、B.T.、N.A.、J.D.、Y.-D.L.、およびE.A.S.、執筆および可視化、H.-IH. IH.およびG.E.H.、資金獲得、H.IH.およびG.E.H.、リソース、D.W.、N.X.、J.C.、M.L.S.、N.K.S.およびG.E.H.、監督、N.X.、N.K.S.およびG.E.H.。
利益申告
著者らは、競合する利益はないと宣言している。
インクルージョンと多様性
本論文の著者のうち1名以上が、研究分野または地理的に代表されることの少ない少数民族であることを自認している。本論文の著者のうち1名以上が、研究分野において性別マイノリティであることを自認している。我々は、包括的で多様かつ公平な研究の実施を支持する。
補足情報
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資料S1. 図S1-S4および表S1-S3
参考文献
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微生物のコロニー形成は、IL-1受容体1を発現しIL-17を産生するガンマ/デルタT細胞の増殖を促進する。
Cell Host Microbe. 2010; 7: 140-150
論文で見る
スコパス(165)
PubMed
要旨
全文
全文PDF
グーグル奨学生
ウェッシュ D.
ピータース C.
オバーグ H.-H.
ピエッチマン K.
カベリッツ D.
TLRリガンドによるγδT細胞応答の調節。
Cell. Mol. 生命科学 2011; 68: 2357-2370
論文で見る
スコープス (104)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
メランドリD.
ズラタレワI.
シャレイユR.A.G.
ダート R.J.
チャンセラー A.
ヌスバウマー O.
ポリアコバ O.
ロバーツ N.A.
ウェシュ D．
カベリッツ D．
他
γδTCRは、空間的に異なる領域をアゴニスト選択と抗原応答性に利用することで、自然免疫と適応免疫を結合する。
Nat. Immunol. 2018; 19: 1352-1365
論文で見る
スコープス (131)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
マッケンジーD.R.
カラ E.E.
バストウ C.R.
タイリス T.S.
フェニックス K.A.
グレゴール C.E.
ウィルソン J.J.
バブ R．
パトン J.C.
カリーズA.
他。
IL-17産生γδT細胞は、静止状態と活性化状態の間で遊走パターンを切り替える。
Nat. Commun. 2017; 8: 15632-15713
論文で見る
スコープス (80)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
イスマイル A.S.
ベアレントC.L.
フーパーL.V.
粘膜傷害時における常在細菌とγδ上皮内リンパ球の相互作用。
J. Immunol. 2009; 182: 3047-3054
論文で見る
スコープス (161)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
ポレーゼB.
トゥライラジャB.
チャン H.
スー C.L.
マクマホン C.A.
フォンテス G．
フサイン S.N.A.
アバディ V.
キング I.L.
プロスタグランジンE2は、バリア炎症時にγδT細胞によるIL-17産生を増幅する。
Cell Rep.
論文で見る
スコープス (9)
PubMed
要旨
全文
全文PDF
グーグル奨学生
デュプラL.
マニエA.
ロルヒオンN.
リチャード M.L.
ダ・コスタG.
タッチ S.
メイユール C.
プランセ J.
アグス A.
ダンヌ C.
et al.
腸内細菌叢由来の短鎖脂肪酸は、マウスおよびヒト腸管γδT細胞によるIL-17産生を制御する。
Cell Rep.
論文で見る
スコープス (75)
PubMed
要旨
全文
全文PDF
グーグル奨学生
ウー P.
ウー D.
ニー C.
Ye J.
Chen W.
Hu G.
Wang Z.
ワン C.
Zhang Z.
Xia W.
他。
γδT17細胞は、ヒト大腸癌における骨髄由来抑制細胞の蓄積と増殖を促進する。
Immunity. 2014; 40: 785-800
論文で見る
スコープス (406)
PubMed
要旨
全文
全文PDF
グーグル奨学生
リー J.S.
タトー C.M.
ジョイス・シャイクB.
グレン M.F.
カヤッテ C.
チェン Y.
ブルメンシャイン W.M.
ジュド M.
アヤノグル G.
マクラナハン T.K.
他
インターロイキン23非依存性IL-17産生は腸管上皮透過性を制御する。
Immunity. 2015; 43: 727-738
論文で見る
スコープス (466)
PubMed
要旨
全文
全文PDF
グーグル奨学生
ド J.-S.
キム S.
ケスラー K.
Jang E.
黄 E.
フェアチャイルド R.L.
ピサロ T.T.
Min B.
腸管ホーミングα4β7およびαEインテグリンを共発現するγδT細胞は、腸管炎症を促進する新規サブセットを規定する。
J. Immunol. 2017; 198: 908-915
論文で見る
スコープス (26)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
バリー A.P.R.
オースティンJ.W.
ボス J.M.
PD-1発現の遺伝的およびエピジェネティック制御。
J. Immunol. 2016; 196: 2431-2437
論文で見る
PubMed
クロスフィルム
グーグル奨学生
セン D.R.
カミンスキーJ.
バーニッツ R.A.
Kurachi M.
ゲルデマンU.
イェーツ K.B.
ツァオ・H.-W.
ゴデック J.
ラフルール M.W.
ブラウン F.D.
ら
T細胞疲弊のエピジェネティック・ランドスケープ。
Science. 2016; 354: 1165-1169
論文で見る
スコープス (567)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
シャープ A.H.
ポーケンK.E.
PD1阻害経路の多様な機能。
Nat. Rev. Immunol. 2018; 18: 153-167
論文で見る
スコープス (946)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
モラン A.E.
ホルツァプフェルK.L.
シン Y.
カニンガム N.R.
モルツマン J.S.
パント J．
ホグキスト K.A.
新規蛍光レポーターマウスによるTregおよびiNKT細胞発生におけるT細胞受容体シグナル強度の証明。
J. Exp. Med. 2011; 208: 1279-1289
論文で見る
スコープス(710)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
プリンツI.
シルバ-サントスB。
ペニントン D.J.
γδT細胞の機能発達。
Eur. J. Immunol. 2013; 43 (-1994): 1988-1994
論文で見る
スコープス (145)
パブコメ
クロス
グーグル奨学生
ウィルハルムA.
タビブ Y.
ナサール M.
ラインハルトA.
ミズラジ G.
サンドロック I.
ヘイマン O.
バロス＝マルティンス J.
アイゼンブド Y.
カライレ・A.
他
IL-17産生γδT細胞と微生物叢の相互作用が口腔粘膜のホメオスタシスを制御している。
Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2019; 116: 2652-2661
論文で見る
スコープス (58)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
西村博之
阿形祐子
川崎明彦
佐藤正樹
今村 聡
湊 N.
八木田浩史
中野剛志
本庶 徹
二重陰性（CD4-CD8-）胸腺細胞表面におけるPD-1タンパク質の発生制御発現。
Int. Immunol. 1996; 8: 773-780
論文で見る
PubMed
クロスフィルム
グーグル奨学生
リャン S.C.
ラッチマン Y.E.
ブールマンJ.E.
トムザック M.F.
ホーウィッツ B.H.
フリーマン G.J.
シャープ A.H.
正常および自己免疫反応におけるPD-1、PD-L1、PD-L2の発現制御。
Eur. J. Immunol. 2003; 33: 2706-2716
論文で見る
スコープス (518)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
カルーソ R．
ロー B.C.
ヌニェスG.
炎症性腸疾患における宿主-微生物叢相互作用。
Nat. Rev. Immunol. 2020; 20: 411-426
論文で見る
スコパス (282)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
ヴェルチッチ A.
ヤン・W.
ヘイヤーJ.
フラゲール A.
ニコラス C.
ヴィアーニ S.
クチェルラパティ R.
リプキン M.
ヤン・K.
オーゲンリヒトL.
ムチンMuc2の遺伝子欠損マウスにおける大腸癌。
Science. 2002; 295: 1726-1729
論文で見る
スコープス (738)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
ヴァン・デル・スルイス M.
デ・コーニング B.A.E.
デ・ブルーインA.C.J.M.
ヴェルチッチ A.
マイエリンクJ.P.P.
ヴァン・グードーバーJ.B.
ビュラー H.A.
デッカー J.
ファン・ゼーニンゲンI.
レネス I.B.
アイナーハンド A.W.C.
Muc2欠損マウスは自然に大腸炎を発症し、MUC2が大腸保護に重要であることを示している。
Gastroenterology. 2006; 131: 117-129
論文で見る
スコパス (1149)
PubMed
要旨
全文
全文PDF
グーグル奨学生
ヴェンツェル U.A.
マグヌッソン M.K.
Rydström A.
ヨンストランド C.
ヘングスト J.
ヨハンソン M.E.V.
ヴェルチッチ A.
Öhman L.
ストリッド H.
シェバル H.
ハンソン G.C.
ウィック M.J.
Muc2欠損マウスにおける自発性大腸炎は、活動性潰瘍性大腸炎の臨床的および細胞的特徴を反映している。
PLoS One. 2014; 9e100217
論文で見る
スコープス (77)
クロスリファレンス
グーグル奨学生
ヤン K.
ブランコ D.B.
チェン X.
ダッシュ P.
ニールG.
ローゼンクランスC.
イーストン J.
チェン W.
チェン C.
ドゥンガナ Y.
Kc A.
Awad W.
グオ X.Z.J.
トーマス・P.G.
Chi H.
代謝シグナルはαβT細胞とγδT細胞の相互的な系譜決定を指令する。
Sci. Immunol. 2018; 3eaas9818
論文で見る
スコープス（48）
クロスリファレンス
グーグル奨学生
ハーリー C.
ジョイス・S.P.
ドンブリデスC.
バチェレT.
ピタール V.
マンナット C.
パッパラルド A.
クージ L.
ネッツァー S.
マッサーラ L.
オブレ E.
ホーチャルO.
ラルティーグ L.
クラベロール S.
カノ C.
モロー J.F.
マフーシュ I.
スベイラン I.
ロシニョール R.
ヴィオレ B.
ウィルコックス C.R.
モハメド F．
ウィルコックスB.E.
ファウスティン B．
Déchanet-Merville J.
EphA2のTCR認識によるAMPK依存性代謝腫瘍再プログラミングのヒトγδT細胞感知。
Sci. Immunol. 2021; 6eaba9010
論文で見る
スコパス (16)
クロスリファレンス
グーグル奨学生
アニピンディ V.C.
バグリP.
ディゼル S.E.
ヒメネス-サイスR.
ジョルダナ M.
スナイダー D.P.
ステンプリ M.R.
Kaushic C.
γδ+T細胞によるIL-17産生は、女性性器管におけるTh17応答の誘導に重要であり、エストラジオールと微生物叢によって制御される。
Immunohorizons. 2019; 3: 317-330
論文で見る
スコープス (17)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
ウィルハルムA.
ブリガス H.C.
サンドロックI.
リベイロ M.
アマド T.
ラインハルト A.
デメラ A.
ホーニッケL.
シュトロウィヒ T.
カルバーリョ T.
プリンツ I.
リボ J.C.
思春期における精巣のIL-17産生Vγ6+ γδ T細胞の微生物叢依存的拡大は、局所組織免疫監視を促進する。
Mucosal Immunol. 2021; 14: 242-252
論文で見る
スコープス (20)
PubMed
要旨
全文
全文PDF
グーグル・スカラー
ブランクC.U.
ヘイニング W.N.
ヘルド W.
ホーガン P.G.
カリーズ A.
ルグリ E．
リン R.C.
フィリップ M．
ラオ A.
レスティフォ N.P.
シーティンガー A.
シューマッハ T.N.
シュワルツバーグ P.L.
シャープ A.H.
シュパイザー D.E.
ウェリー E.J.
ヤングブラッド B.A.
ゼーンD.
T細胞疲弊」の定義
Nat. Rev. Immunol. 2019; 19: 665-674
論文で見る
スコープス (596)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
ポーケン K.E.
サモンズM.A.
オドリッツィ P.M.
マンネ S.
ゴデック J.
カーン O．
ドレイク A.M.
チェン Z．
セン D.R.
Kurachi M.
et al.
疲弊したT細胞のエピジェネティックな安定性は、PD-1遮断による再活性化の持続性を制限する。
Science. 2016; 354: 1160-1165
論文で見る
スコープス (769)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
Shi J.
Hou S.
ファンQ.
Liu X.
Liu X.
Qi H.
PD-1は濾胞Tヘルパー細胞の位置と機能を制御する。
Immunity. 2018; 49: 264-274.e4
論文で見る
スコープス (262)
PubMed
要旨
全文
全文PDF
グーグル奨学生
王 C.
ヒルサマー P.
キム C.H.
PD-1を発現するヒト濾胞性ヘルパーT細胞サブセットの表現型、エフェクター機能、組織局在。
BMC Immunol. 2011; 12 (53-15)
論文で見る
スコパス (44)
クロスリファレンス
グーグル奨学生
レイノソ E.D.
エルペック K.G.
フランシスコ L.
ブロンソンR.
ベルマーレ・ペレティエA.
シャープ A.H.
フリーマン G.J.
ターリー S.J.
腸管寛容はPD-1リガンド遮断により自己免疫性腸炎に転換する。
J. Immunol. 2009; 182: 2102-2112
論文で見る
スコープス (98)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
ライズB.S.
ダーシー P.W.
カーン I.Z.
ムーン C.S.
コーンバーグ A.E.
シュナイダー V.S.
アルバレス Y.
エレソ O.
朱 C.
シェルンタナー M.
ロックハート A.
リード A.
ボルトラット J.
カストロ T.B.R.
ビラテ A.M.
グリベンニコフ S.
ハン A.S.
ムチダD.
TCR-Vγδの使用は、原腫瘍と抗腫瘍腸管γδT細胞サブセットを区別する。
Science. 2022; 377: 276-284
論文で見る
スコープス (24)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
エドワーズ S.C.
ヘドリー A.
ホーヴェナー W.H.M.
ヴィーシューR.
グラウナー T.
キルビー A.
ショウ R．
ブフェア K.
バタダ N.
波多野 聡
ヨシカイ Y.
ブライス K.
ミラー C.
キルシュナー K．
コフェルト S.B.
PD-1とTIM-3はマウスIL-17A産生γδT細胞のサブセットを異なって制御する。
J. Exp. Med. 2023; 220e20211431
論文で見る
スコープス (5)
クロスリファレンス
グーグル奨学生
岩崎正明
田中康夫
小林秀雄
村田・平井
宮部秀樹
杉江貴志
戸井正明
湊 直樹
リン酸化抗原を認識するヒトγδT細胞におけるPD-1の発現と機能。
Eur. J. Immunol. 2011; 41: 345-355
論文で見る
スコープス (116)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
Hoeres T.
ホルツマンE.
スメタック M.
ビルクマンJ.
ヴィルヘルム M.
PD-1シグナルは、白血病に応答するγδ（ガンマデルタ）T細胞によるインターフェロン-γ産生を調節する。
OncoImmunology. 2019; 81550618
論文で見る
スコープス (51)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
Wu Y.
カイル-セザールF.
ウルフ・R.T.
ナセウール・ロンバルデリ C.
オーウェン J.
ビスワス D.
ロレンク A．
ヴァントゥールP.
ガジンスカ P.
グリゴリアディスA.
タット A.
ヘイデイ A.
ヒト乳房における生得的なVδ1+γδT細胞コンパートメントは、トリプルネガティブ乳癌の寛解と関連している。
Sci. Transl. Med. 2019; 11eaax9364
論文で見る
スコープス (81)
クロスリファレンス
グーグル奨学生
Hsu H.
ブードバ S.
ムヴラ G.
ディバラ T.H.
レイチ D.
ムングウィラ R.G.
ボルドリン F．
デギアコミG.
マンガネッリ R.
ラウファー M.K.
カイロ C.
PD-1発現の加齢に伴う変化は、乳児期のVδ2 T細胞における細胞傷害能の増加と一致している。
細胞。Immunol. 2021; 359104244
論文で見る
スコパス(2)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
ソン M.-Y.
ホン C.-P.
パク S.J.
キム J.-H.
ヤン B.-G.
パク Y.
キム S.W.
キム K.S.
リー J.Y.
Lee S.-W.
Jang M.H.
Sung Y.C.
大腸炎の2つの異なる動物モデルに対するFc融合PD-L1の保護効果。
Gut. 2015; 64: 260-271
論文で見る
スコープス (75)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
Liang J.
ホアン・H.-I.
ベンザッティ F.P.
カールソン A.B.
Zhang J.J.
Youssef N.
マー A．
ヘール L.P.
ハマーG.E.
腸における炎症性Th1とTh17はそれぞれ、MyD88に異なる要求を持つ機能的に特化した樹状細胞によって駆動される。
Cell Rep.
論文で見る
スコープス (35)
PubMed
要旨
全文
全文PDF
グーグル奨学生
シュー・ヴァンパラ S.
ディアヘイク M.E.
ウィートンJ.D.
パーカー M.E.
ジュヴヴァディ P.R.
マカイバーN.
シオファーニ M．
篠原M.L.
CXCL2の発現に基づく肺胞マクロファージ集団の機能的不均一性。
Sci. Immunol. 2020; 5eaba7350
論文で見る
PubMed
クロスレフ
グーグル奨学生
アンダーソン K.G.
メイヤー-バーバーK.
Sung H.
Beura L.
ジェームズ B.R.
テイラー J.J.
クナジL.
グリフィス T.S.
ヴェジス V.
バーバー D.L.
マソプストD.
血管内染色による血管白血球と組織白血球の識別。
Nat. Protoc. 2014; 9: 209-222
論文で見る
スコープス (472)
PubMed
クロス
グーグル奨学生
論文情報
出版履歴
オンライン公開 2023年08月08日
受理済み 2023年7月24日
改訂版受理 2023年5月12日
受理：2023年5月12日 2022年4月11日
識別
DOI: https://doi.org/10.1016/j.celrep.2023.112951

著作権
© 2023 The Author(s).
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図1大腸常在γδT細胞におけるPD-1発現はγδ17サブセットに特異的である。
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図2微生物叢はγδ17細胞上のPD-1を維持し、内因性γδ17エフェクターによる天然のIL-17産生を制限する。
図サムネイルgr3
図3炎症に伴うγδ17細胞の活性化はPD-1とIL-17産生を誇張する
図サムネイルgr4
図4炎症に伴うγδ17細胞の活性化により、γδ17細胞のダイナミックな代謝の再配線が起こり、大腸LPへの脂質の取り込みが促進される。
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